朱鹮(Nipponia nippon)粪便中类固醇激素和免疫球蛋白的研究

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朱鹮(Nipponia nippon)是世界濒危物种,其生存状态一直是保护生物学研究的重点领域,受到广泛关注。朱鹮类固醇激素和免疫球蛋白的研究对测定其繁殖、应激、免疫力生理指标以及对朱鹮保护具有重要作用。由于濒危野生动物的特殊性,对于些如血液采集等损伤性取样已经不符合学科发展的前沿,越来越多的学者开始关注非损伤性检测技术。本文以粪便作为非损伤性检测的材料,探讨并建立朱鹮粪便中类固醇激素和免疫球蛋白提取和检测的方法;测定朱鹮成体、亚成体及幼鸟粪便中的类固醇激素和免疫球蛋白含量,为朱鹮的保护和日常监测提供基础数据;对朱鹮粪便中的性激素水平进行监测分析,探讨其对朱鹮生殖的调节作用;此外,对元旦期间朱鹮粪便中的皮质酮和免疫球蛋白含量进行测定,以评估游人干扰对朱鹮的影响。为此,本研究于2011年2月-2012年2月对陕西洋县朱鹮救护饲养中心的朱鹮进行了粪样采集,运回实验室进行处理测定,所得的主要结果如下:1对不同甲醇比例样品进行酶联免疫反应的检测结果进行比较发现,甲醇比例达到10%及以上会对检测结果产生显著影响,建议在进行酶免测定前用磷酸缓冲液(PH=7.4,0.02M)对样品进行至少20倍的稀释。2对朱鹮粪便中的IgA进行测定表明,成体和亚成体朱鹮中,性别(P=0.090)和年龄阶段(P=0.938)对朱鹮粪便IgA成的浓度均无显著影响,但雏鸟粪便中的IgA浓度显著高于成体朱鹮(P=0.005),雏鸟粪便中的IgA浓度在25日龄之前呈上升趋势,之后下降并趋于平稳。3对朱鹮粪便中的皮质酮进行测定表明,朱鹮粪便中的皮质酮浓度不存在显著的性别差异(P=0.423),但成体与亚成体朱鹮之间粪便中的皮质酮浓度存在显著差异(P=0.016),雏鸟粪便中的皮质酮浓度显著高于成体(P=0.004)和亚成体(P=0.007)朱鹮,推测年龄是朱鹮应激能力的影响因素之一4对朱鹮粪便中的皮质酮与IgA浓度测定的结果显示,皮质酮含量与免疫球蛋白的含量具有相关性,含量较低时有利于免疫能力的增强,而较高的皮质酮含量对免疫球蛋白的产生有抑制作用。5朱鹮粪便中的皮质酮含量与当日游客量具有显著相关性,观赏笼与处于人流量较少的大网笼西侧标准笼中朱鹮粪便中的皮质酮含量没有显著差异(P=0.509),为避免严重应激对朱鹮的干扰,应适时适当的控制客流量。6对雌雄朱鹮一年不同阶段中粪便内的雌二醇、睾酮和孕酮进行检测。结果表明,性激素均具有阶段性变化,雌性朱鹮中雌二醇含量在求偶前期及求偶期较高且在产卵后含量下降,睾酮在产卵期浓度上升并在孵化期保持较高水平,孕酮含量在育雏期较高;雄性朱鹮中,雌二醇含量变化相对平稳,睾酮含量在求偶交配其含量减低,孵化育雏期处于较高水平,孕酮含量与雌性朱鹮变化基本一致。总之,性激素能够调节朱鹮的生理机能,对朱鹮的生殖生理状态具有指示作用。
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