药品质量问题关系国计民生。近年来,由于环境污染日益恶化,中药材种植中缺乏GAP规范管理,中药材中农药残留超标事件时有发生,严重危害中药使用安全,影响中药的国际形象,已成为制约中药走向国际化、现代化的“瓶颈”。随着检测技术的不断发展,各国对农药残留检测日益关注,尤其是美国、日本、韩国、德国在植物药农残检测分析技术和安全性控制上较为领先,而我国起步则较晚,目前技术相对落后。因此制订科学、可行的中药中农药多残留检测技术平台已成为控制中药中农药残留需要面对的首要问题。本文建立了中药材中198种农药多残留的前处理技术平台及气相色谱-质谱联用(GC-MS)检测方法,并对部分农药提出了限量标准建议。主要从以下四个方面着手加以研究:1.检测指标的确定。农药种类众多,在欧盟目前注册的农药及其化学相关品约达1000多种。对全部所有农药进行监测是不现实也是不必要的,本课题通过实地调研与文献检索相结合的方式,初步了解国内中药材种植实际使用农药情况,国内农药生产情况,对高毒农药、国内外重点监控农药品种进行了归纳总结。选择了具有监管意义的198个代表性农药品种作为本研究的检测指标。2.中药中农药多残留测定前处理技术平台的建立。农药多残留分析前处理过程主要包括取样、提取、净化、富集浓缩等操作。中药材药用部位多样,基体类型多变,这些特点决定了样品前处理过程尤其复杂。依靠现有技术手段,在中药材的农药多残留分析中,试图建立单一的前处理方法,满足各类中药材中数百种农残测定,是不现实的。本课题以凝胶渗透色谱(GPC)、固相萃取(SPE)为主要技术手段,通过优化洗脱溶剂、洗脱体积等参数,建立了适合于198种农药分析的3种前处理净化方法,可以依据中药不同基质、待测农药性质灵活选择采用,形成前处理技术平台。并选用了山药、黄芪、金银花、陈皮四种不同基质类型的常用中药材,进行了方法学考察。三水平的添加回收率绝大部分在70%-120%之间,相对标准偏差小于15%(n=9),符合残留分析技术要求。3.建立了添加分析保护剂以补偿基质增强效应的农药多残留的GC-MS检测方法。基质增强效应是食品、农产品、中药材农药多残留分析中最重要的干扰因素之一,严重影响分析灵敏度和准确度。与基质标液匹配方法相比,添加分析保护剂是一种更加有效和简便的基质补偿方法。本实验首先考察了198种农药中易产生基质效应的农药品种,其次筛选了7种化合物,考察其效果,最终选择D-核糖酸-γ-内酯(2mg/ml)和山梨醇(1mg/ml)的组合作为分析保护剂。经验证该法可有效的补偿基质效应对多数农药定量分析造成的误差,改善峰形和分离度,提升了灵敏度,降低了检出限,在农药多残留检测上获得了技术突破。4.开展了初步样品普查,对部分农药提出了限量标准建议。利用所建立的农药多残留前处理和检测平台,对120种333批次常用中药材中的198种农药残留进行了检测。对检测结果进行了统计分析,初步掌握了常用中药材中农残污染的现实情况,确定了部分需重点监测的药材品种以及重点监控的农药指标。同时,以WHO/FAO提出的相关农药毒性数据为主要依据,并结合国内外相关法定标准现状,提出了中药材中部分农药残留的限量标准建议。本课题是国家十一五“重大新药创制”专项“中药中有害残留物检测技术标准平台”课题中的一部分。