目的:刚地弓形虫疾病在全世界范围内普遍流行,对人类的身体状况造成了严重的伤害。因此,研制弓形虫疫苗治疗弓形虫疾病迫在眉睫。本实验研究目的主要是评估弓形虫肌动蛋白结合蛋白(Toxofilin)基因疫苗对小鼠的免疫效果。此外,我们分别将单佐剂(铝盐佐剂(alum),脂质体A(MPLA)),双佐剂(alum+MPLA)分别与Toxofilin DNA疫苗联合使用注入到宿主体内从而进行筛选宿主抗体表达能力。方法:使用生物信息学的方法,我们分析了 Toxofilin表达蛋白的氨基酸排列序列,并且运用相关生物学软件预测了 Toxofilin蛋白几个潜在的B细胞,T细胞抗原表位。将BALB/c小鼠分为四个实验组(单Toxofilin DNA疫苗,alum佐剂+DNA疫苗,MPLA佐剂+DNA疫苗,双佐剂(alum+MPLA)+ DNA疫苗),并且将上述四组实验试剂连续免疫小鼠三次,通过检测弓形虫总抗体以及细胞因子的含量来评价小鼠产生的免疫反应。待第三次免疫小鼠14天后,将致死性剂量的弓形虫(RH株)速殖子腹腔注射到小鼠体内,通过观察小鼠的存活时间进而来验证DNA疫苗并且结合不同佐剂对小鼠的免疫保护性。结果:所有实验组(Toxofilin,Toxofilin+alum,Toxofilin+MPLA,Toxofilin+alum+MPLA)免疫小鼠后,在其小鼠体内,细胞免疫与体液免疫水平都明显高于对照组(PBS,alum,MPLA)。此外,与单基因组(Toxofilin)疫苗相比,alum+Toxofilin基因疫苗联合使用增强了体液免疫应答与Th2型细胞免疫应答,相反地MPLA+Toxofilin 一起使用增强了体液免疫应答与Thl型细胞免疫反应。更重要地是,与alum+Toxofilin相比,将MPLA与alum+Toxofilin基因疫苗联合使用能够转变alum+Toxofilin基因疫苗中细胞免疫应答的类型,将Th2型细胞免疫转变为Thl型细胞免疫,同时,在alum+MPLA+Toxofilin基因疫苗免疫组中,体液免疫与Thl型细胞免疫应答都显著高于其它实验组与对照组,最后通过弓形虫速殖子攻击实验来评价基因疫苗与不同佐剂对小鼠的免疫保护性,结果表明,与其它实验组与对照组相比,alum+MPLA+Toxofilin基因疫苗明显地延长了小鼠的存活时间。结论:刚地弓形虫Toxofilin基因可以作为一个合适的候选疫苗,将复合佐剂alum+MPLA与Toxofilin基因共同使用,使小鼠体内的免疫应答包括细胞免疫与体液免疫应答都明显地增强与提高。