论文部分内容阅读
胃癌的发生发展受到多种因子的调节,具有多过程的发病特点。在肿瘤等多种疾病中,miRNA具有重要的功能。miRNA既可作为抑癌基因也可作为致癌基因,从而在肿瘤发生发展的全过程中发挥不同的作用,同时miRNA自身也可以发生突变或缺失等现象,进而影响相关基因的表达发生异常。miR-128b是一种在神经系统中高表达的niRNA,其异常表达与神经胶质瘤、阿尔兹海默症等疾病密切相关。近年来研究证实,miR-128b与多种肿瘤的增殖、分化、凋亡、侵袭和转移有关。niR-128b已成为与肿瘤诊断、治疗和预后相关的具有潜在价值的肿瘤标志物。然而,niR-128b在胃癌中的作用目前尚未明确,因此,研究miR-128b在胃癌发生发展过程中发挥的作用及其作用靶点的探讨十分具有意义。目的：本研究旨在探讨miR-128b在胃癌细胞中的表达情况和生物学功能及其抑制胃癌细胞转移和促进胃癌细胞凋亡的机制。同时通过探究miR-128b在胃癌组织中的表达水平以及在胃癌治疗中的临床意义,为发现胃癌早期诊断和后期治疗相关分子标志物奠定基础。方法：实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测3种胃癌细胞中miR-128b和TRIM29 mRNA的表达水平；MTT法检测转染miR-128b mimics和TRIM29 siRNA后胃癌细胞(BGC-823)增殖情况;流式细胞术检测细胞周期；细胞划痕、Transwell分别探究miR-128b和TRIM29对BGC-823细胞的侵袭和凋亡作用；双荧光酶素验证miR-128b与TRIM29存在直接的靶向作用关系；分析miR-128b过表达对TRIM29 mRNA及其蛋白表达的相关性；分析miR-128b的表达水平与胃癌临床病理资料的关系。结果：miR-128b在胃癌组织和胃癌细胞中的表达显著下调,TRIM29在胃癌细胞中表达明显上调。miR-128b过表达和TRIM29低表达均能够抑制胃癌细胞的增殖,促进起凋亡,并减弱其迁移和侵袭能力(P<0.01)；miR-128b与TRIM29存在直接靶向负作用关系。此外,miR-128b随着胃癌临床分期增高而下调(P<0.01),miR-128b在有淋巴结转移患者中的表达显著低于无淋巴结转移患者(P<0.01),胃癌患者的预后与胃癌组织中miR-128b的表达有很明显的关系：miR-128b表达越低,患者预后越差(P<0.01)。结论：1)在胃癌组织和细胞中,miR-128b表达会下调,TRIM29表达会上调,且与胃癌临床分期和淋巴结转移相关；2) miR-128b过表达能够降低TRIM29的表达,从而抑制胃癌细胞转移和促进胃癌细胞凋亡；3)胃癌组织中miR-128b的表达量与患者预后相关。