庆大霉素的使用与大鼠哮喘发病率的相关性及其机理研究

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目的:通过对新生乳鼠进行庆大霉素灌胃处理,研究庆大霉素的使用与大鼠哮喘发病的相关性,并且探讨其机理,从而为预防哮喘等过敏性疾病提供新的思路。方法:将32只新生乳鼠随机分成4组:Ⅰ组(对照组)、Ⅱ组(庆大霉素灌胃组)、Ⅲ组(哮喘模型组)、Ⅳ组(庆大霉素灌胃+哮喘模型组)。对Ⅱ组、Ⅳ组新生乳鼠于出生后24小时内给予庆大霉素(剂量为193.2mg/kg)灌胃,每天2次,连续2周。对Ⅰ组、Ⅲ组新生乳鼠以生理盐水代替庆大霉素等量、同法,同期灌胃。将所有大鼠养至六周龄后,对Ⅲ组、Ⅳ组大鼠采取先给予卵蛋白(OVA)、氢氧化铝皮下注射致敏以及百日咳杆菌腹腔注射致敏,而后给予OVA雾化激发的方法制备哮喘动物模型,对Ⅰ组、Ⅱ组大鼠以生理盐水代替卵蛋白等量、同法,同期皮下注射及雾化激发。检测如下指标:(1)大鼠哮喘发作的行为学指标:记录雾化激发后每只大鼠喷嚏、抓鼻次数及喘息程度,并进行评分。(2)大鼠肠系膜淋巴结的发育情况:取Ⅰ组、Ⅱ组大鼠肠系膜淋巴结做病理切片,常规H-E染色。(3)大鼠肺组织炎性浸润情况:病理切片,常规H-E染色,并进行评分。(4)大鼠血清中IL-17的含量:ELISA法。(5)大鼠血清中IL-17的含量与肺组织炎性浸润的半定量计分之间的关系评价:采用统计学直线回归和直线相关的模型分析方法。结果: 1大鼠哮喘发作的行为学观察评分:Ⅰ组(0±0)、Ⅱ(0±0)组大鼠无喷嚏、抓鼻及喘息之表现;Ⅲ组(4.25±0.87)、Ⅳ组(6.75±0.74)经过致敏及雾化激发之后出现明显的喷嚏、抓鼻及喘息症状(P<0.05),而且,Ⅳ组表现得更加明显,其评分明显高于Ⅲ组(P<0.05)。2Ⅰ组、Ⅱ组大鼠肠系膜淋巴结发育情况:对照组大鼠肠系膜淋巴结结构未见明显异常。而经过庆大霉素灌胃处理的大鼠其皮质区淋巴小结的小结帽、明区、暗区结层次消失,表现为均一的暗区结构,且相邻的淋巴小结呈现出相融合的趋势。副皮质区明显扩大,呈增殖表现。淋巴结髓质结构中,髓索结构稍呈增殖表现,而髓窦中有较多的致密物质沉积。3各组大鼠肺组织炎性浸润情况:Ⅰ组、Ⅱ组小支气管、细支气管、伴行小动脉均正常,几无血管周围炎症、支气管周围炎、水肿、上皮细胞损害等炎症表现,Ⅱ组偶有上皮损害、肺泡水肿之表现,但程度较轻,与对照相比差异无显著性( p>0.05)。Ⅲ组、Ⅳ组肺组织炎性浸润则表现得较为明显(P<0.05),而且,Ⅳ组表现得更加明显,其肺部病理改变半定量计分明显要高于Ⅲ组(P<0.05)。4各组大鼠血清中IL-17的含量:与Ⅰ组(0.0545±0.0095)相比较,Ⅱ组(0.0668±0.0072)大鼠血清IL-17含量稍高(p<0.05) ,而Ⅲ组( 0.1185±0.0122)、Ⅳ组( 0.1981±0.0137)IL-17含量明显提高(p<0.05)。而且Ⅲ组、Ⅳ组两组相比较,Ⅳ组IL-17含量明显高于Ⅲ组(p<0.05)。5大鼠血清中IL-17的含量与肺部病理改变半定量计分之间的关系:血清中IL-17含量和肺部病理改变半定量计分之间存在着线性关系(p<0.05),血清中IL-17含量可以反映肺部炎性浸润的严重程度。结论:对新生乳鼠采取庆大霉素灌胃处理,减少其幼年时期接受免疫原的刺激机会将会影响其免疫器官的发育,增加患哮喘的机会,加重喘息的临床表现以及肺部炎性浸润的程度。该研究结论为预防哮喘等过敏性疾病提供了新的思路。
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