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L-甲硫氨酸(L-Met)是人体的必需氨基酸之一，广泛应用于医药、食品、饲料等行业。利用微生物海因酶系统生产L-Met的方法，具有经济、环保等特点，有较高的工业应用价值。本实验室从川西高原土样中分离到具有M-海因水解酶活性的芽孢杆菌属菌株MV0073，能催化M-海因(D，L-5-甲硫基乙基乙内酰脲)生成L-Met，但其产量较低。为了选育L-Met高产菌株，对MV0073进行了诱变处理，选育各种抗性高产菌株，并对突变株发酵条件进行了一定的研究。 以MV0073为出发菌株，用紫外线照射为诱变因子，选取致死率为82.5％，正突变率为13.67％的诱变剂量进行诱变处理。用L-Met的结构类似物乙硫氨酸(Eth)筛选培养基平板进行筛选，没有得到L-Met高产突变株。 实验表明亮氨酸(Leu)对MV0073生长有抑制作用，而L-Met对此生长抑制有恢复作用，表明可利用含Leu平板筛选L-Met高产突变株。用Leu筛选培养基平板进行筛选，经3轮诱变后，得到突变株M0361。M0361的L-Met产量是MV0073的1.86倍左右。 用亚硝酸诱变处理M0361后，筛选Leu抗性株，突变株L-Met产量无明显增加。 用0.3mg／mL溶菌酶溶液，37℃作用2.5-3h，制备M0361菌株的原生质体，原生质体形成率为86.2％。原生质体再经紫外线处理后，用含M-海因类似物5-氟尿嘧啶(5-FU)平板筛选，得到L-Met高产突变株M0537。 以M0537为出发株，紫外线诱变后，涂布于含0.059/L Eth、69/L Leu和19/LS一f7U的多重抗性筛选培养基平板，得到L一Met产量大于1.09/L的突变株M0658。由洗脱法测得M0658的L一Met产量为1.099/IJ，是出发菌株MV0073的3.14倍。M0658连续传代六次，L一Met产量稳定。 通过单因子试验和正交试验，对M0658发酵条件进行了优化研究。确定l%蔗糖，0.1%NH，NO:，，0.3%KZHPO，，0.2%KHZPO。，M一海因0.59/L，金属离子混合物1%，维生素混合物2%为较适的L一Met高产培养基组成。培养基的起始PlI在8.0一9.0，培养温度在35℃一37℃为较适的培养条件。在以上发酵条件下，MO658的L一Met产量为1.379/L，是原发酵培养基L一Met产量的1.22倍。