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背景急性肾损伤(acute kidney injury, AKI)是指一组以急性肾功能减退为特征的临床综合征,常见继发原因为药物、手术等因素,主要以尿量减少、氮质血症、液体平衡紊乱和电解质紊乱为临床表现,分为肾前性、肾性和肾后性三种类型。近年来,随着各种药物应用及环境变化,其发生率正在逐年增加,严重者可危及患者生命。据统计,在住院及非住院病人中,仅由肾毒性药物引起的AKI大约占20%。顺铂(cis-diamminedichloroplatinum Ⅱ, CDDP)是一种广泛应用于实体瘤和血液肿瘤的抗癌药物,在20%接受药物治疗的患者中发生肾毒性,引起肾小管上皮细胞损伤,因此成为其临床应用的一个重要限制因素。在实验中通常通过应用CDDP诱导动物AKI模型,关于应用CDDP诱导动物模型的剂量大小问题,已有的文献报道不完全统一。本实验通过不同剂量的CDDP建立AKI模型,观察血肌酐(serum creatinine, Scr)浓度及血红素氧化酶-1(heme oxygenase-1, HO-1)、调节正常T细胞表达和分泌因子(regulated upon normal T cell expressed and secreted factors, RANTES)的表达在病理过程中的变化。目的1.观察不同剂量、不同时间点CDDP的肾毒性作用。2.研究HO-1和RANTES在AKI疾病发展过程中的表达情况并探讨其意义。方法1. 选取60只6-8周左右健康雄性昆明小鼠,采用随机数字法分为4组：模型组A、B、C,正常对照(normal control, NC)组。模型组通过单次腹腔注射CDDP,剂量分别为：10mg/kg、15mg/kg、25mg/kg。依据参考文献,注射CDDP前用等量0.9%无菌生理盐水稀释其浓度为1mg/ml,建立AKI动物模型,NC组分别注射等剂量生理盐水。2. 分别在模型建立后第1、3、5天,不同时间点每组各随机抽取5只小鼠,收集血液标本检测Scr浓度,并取肾组织采用苏木精-伊红染色(hematoxylin eosin staining, HE),观察各组肾组织病理改变,运用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)和免疫组织化学(immunohistochemical, IHC)染色方法测定各组小鼠肾脏组织HO-1和RANTES的浓度及表达情况。结果1. 与NC组比较,3d、5d模型各组的Scr浓度明显上升,差异具有统计学意义(P<0.05)。模型各组两两比较,Scr浓度水平之间的差异具有统计学意义(P<0.05)2. 与NC组比较,模型各组HO-1和RANTES的蛋白浓度明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。模型各组两两比较,HO-1和RANTES的浓度水平之间的差异具有统计学意义(P<0.05)3.与Scr相比较,HO-1和RANTES的浓度在肾损伤发生早期明显升高。结论1.证实CDDP的肾毒性呈剂量依赖性、时间累积性。2.HO-1可能通过抑制氧超载反应,在AKI修复过程中发挥保护性作用。3.在CDDP诱导的AKI过程中,RANTES作为重要因子,参与AKI的发展过程。