目的纯化重组人瘦素蛋白并制备抗人瘦素单克隆抗体,对其生物学特性进行鉴定,并建立乳腺癌患者血清瘦素水平检测方法。方法将由大肠杆菌( E.coli)重组表达获得的rh-leptin,复性、纯化后进行SDS-PAGE电泳和Western-blot印迹杂交鉴定其免疫学活性。采用B淋巴细胞杂交瘤技术,以人瘦素免疫Balb/c小鼠,常规融合,以间接ELISA方法筛选阳性克隆,有限稀释法亚克隆筛选单克隆细胞株,并对其进行核型、亚类、效价、特异性等特性鉴定。建立以间接ELISA法检测血清瘦素水平的方法,并探讨该方法的精密度、准确性和特异性等。结果成功获得了两株能够稳定分泌抗人瘦素单克隆抗体的杂交瘤细胞株6A5和3F7,所分泌单克隆抗体的亚型为IgG1和IgG2b。建立了以间接ELISA检测血清瘦素水平的方法。结论纯化了重组人瘦素蛋白并制备了抗人瘦素的单克隆抗体,所建立的双抗夹心ELISA检测血清瘦素水平的方法符合测定标准要求,可以应用于临床乳腺癌患者的血清检测。