核桃楸青果皮生物活性及活性成分研究

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本文研究了核桃楸青果皮95%乙醇提取物、石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取相杀虫活性;研究了它们对杨树烂皮病等3种林业病害的抑菌作用;考察了它们对大豆等3种植物化感作用;利用紫外-可见分光光度法,以胡桃醌和总黄酮为指标,考察了乙醇提取物的稳定性;利用GC-MS技术探索了乙酸乙酯和氯仿萃取相的化学组成、化学结构和相对含量。研究结果如下:(1)触杀活性试验采用药液浸虫法,胃毒活性试验采用叶片浸药饲虫法,各萃取相对舞毒蛾幼虫有显著的杀虫活性。乙醇提取物的杀虫活性强于氯仿、石油醚、乙酸乙酯萃取相,并且触杀作用比胃毒作用试虫死亡率高,药效快。(2)抑菌活性筛选采用滤纸片法,青果皮抑菌活性组分富集在石油醚和氯仿萃取相中,这两种萃取相对杨树烂皮病、樟子松枯梢病、杨树叶枯病这3种林业病害都有抑制作用;乙醇提取物对这3种菌种都没有抑制作用,并确定了不同萃取相对不同菌种的最低抑菌浓度。(3)化感活性测试采用滤纸培养皿法,通过测试确定石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取相对大豆、紫花苜蓿、白菜都有化感作用,氯仿、石油醚萃取相对大豆和紫花苜蓿的化感指数与浓度呈二次函数关系,各萃取相对白菜的萌发都有很强的抑制作用。活性测试为活性物质的提取和在农林方面的应用提供了科学依据。(4)以胡桃醌、总黄酮降解率作为指标,研究温度、pH值、光照三个因素对核桃楸青果皮乙醇提取物稳定性的影响。乙醇提取物随温度升高稳定性显著降低;pH值在4~8之间时,稳定性较好;温度升高或pH值变化时,核桃楸乙醇提取物中的胡桃醌、总黄酮降解具有一级反应的特征;光照使核桃楸乙醇提取物的稳定性降低。稳定性研究为确定核桃楸青果皮乙醇提取物保存条件提供理论依据。(5)用化学预试法、GC-MS技术探索了青果皮氯仿萃取相的化学成分。化学预试结果显示,氯仿萃取相中含有酚类、鞣质、有机酸、萘醌类物质、黄酮类物质、内酯、香豆素。氯仿萃取相TCL最佳展开剂为氯仿:甲醇=8:1,通过TLC分离和HPLC检测,进一步证明核桃楸青果皮氯仿中含有生物活性物质胡桃醌。利用GC-MS技术,从核桃楸青果皮氯仿萃取相中分离确认15种化合物,相对含量占氯仿萃取物的95.79%;含量最大的是5-羟基-1,4-萘醌,相对含量27.11%。利用GC-MS技术从乙酸乙酯萃取相中分离确认24种化合物,占乙酸乙酯萃取相总含量94.55%;含量最大的是5-羟基-1,4-萘醌,相对含量31.20%。
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