论文部分内容阅读
目的：探讨CIK细胞对人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP体外杀伤效应及逆转作用。方法：1.CIK细胞的制备：取健康人外周血单个核细胞,经IFN-γ, IL-2,抗CD3单抗等联合诱导CIK细胞。2.用MTT法分别检测顺铂、CIK细胞、CIK联合顺铂对人肺腺癌细胞A549及人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP的杀伤活性,计算耐药倍数,逆转倍数。结果：1、顺铂对人肺腺癌细胞A549及人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP的50%杀伤浓度(IC50)值分别为1.823μg/ml、6.392μg/ml,差异有统计学意义(P<0.05),耐药倍数(IR)=3.506。2、CIK对人肺腺癌细胞A549及人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP均有杀伤作用,CIK对人肿腺癌细胞A549的50%杀伤密度(IC50)为7.657×105个细胞/ml,对人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP50%杀伤密度(IC50)为7.955×105个细胞/ml,差异无统计学意义(P>0.05)。3、通过实验确定CIK细胞对人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP10%杀伤密度(IC10=4.130×105个细胞/m1)为CIK细胞作用人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP的无毒剂量,以排除CIK细胞对人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP的干扰,选定CIK细胞1C1o值以下的三个密度(1×105个细胞/ml、2×105个细胞/ml、3×105个细胞/m1)先与人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP作用44小时,再加顺铂作用4小时后,其结果IC5o值分别降至1.743μg/ml、1.336μg/ml、0.883μg/ml,差异有统计学意义(P<0.05)；计算逆转倍数(FR)分别为(3.667、4.784、7.239)结论：1.顺铂对人肺腺癌细胞A549及人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP均有杀伤活性,对人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP杀伤性弱,表明人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP对顺铂耐药。2.CIK对人肺腺癌细胞A549及人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP均有杀伤作用,差异无统计学意义。3.CIK联合顺铂作用于人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP,可以增加顺铂对人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP杀伤活性。逆转倍数随着CIK密度增加而增大,CIK细胞能部分逆转人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP对顺铂的耐药,其机制有待进一步研究证实。