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目的研究IGFBPrP1 siRNA对大鼠肝星状细胞凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞株(HSC-T6),分别设立:(1)正常对照组:不加任何转染试剂,不加siRNA;(2)阴性对照组:加转染试剂和阴性对照siRNA;(3)IGFBPrP1 siRNA转染组:加转染试剂和IGFBPrP1 siRNA。IGFBPrP1 siRNA转染大鼠肝星状细胞,转染不同时间(24h,48h,72h)后,用CCK-8试剂盒检测肝星状细胞增殖的变化,AnnexinV/PI双标法流式细胞术检测肝星状细胞凋亡的变化,免疫细胞化学染色法检测肝星状细胞中P53、Bcl-2蛋白表达的变化。结果(1)CCK-8检测结果显示:IGFBPrP1 siRNA转染大鼠肝星状细胞不同时间(24h,48h,72h)后,各时间点IGFBPrP1 siRNA转染组OD值减小,与正常对照组及阴性对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.01),各时间点IGFBPrP1 siRNA转染组细胞抑制率升高,与正常对照组及阴性对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.01);(2)流式细胞术检测结果显示:IGFBPrP1 siRNA转染大鼠肝星状细胞不同时间(24h,48h,72h)后,各时间点IGFBPrP1 siRNA转染组凋亡率与正常对照组及阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01),而阴性对照组与正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);(3)免疫细胞化学染色结果显示:IGFBPrP1 siRNA转染大鼠肝星状细胞48h后,P53蛋白的表达:各组均呈P53阳性表达,即细胞胞核内均可见清晰的棕黄色或棕褐色颗粒沉积,但各组在阳性细胞数量与着色深浅上有所不同。图像分析及数据统计结果显示:与正常对照组及阴性对照组相比,转染组P53蛋白的表达量显著增高(F=84.792,P<0.01);Bcl-2蛋白的表达:各组均呈Bcl-2阳性表达,即细胞胞浆内均可见清晰的棕黄色或棕褐色颗粒沉积,但各组在阳性细胞数量与着色深浅上有所不同。图像分析及数据统计结果显示:与正常对照组及阴性对照组相比,转染组Bcl-2蛋白的表达量明显降低(F=235.407,P<0.01)。结论(1)IGFBPrP1 siRNA能显著抑制大鼠肝星状细胞的增殖且能促进其凋亡;(2)上调P53的表达,下调Bcl-2的表达可能是IGFBPrP1 siRNA诱导大鼠肝星状细胞凋亡的途径之一;(3)推测抑制IGFBPrP1的表达有可能成为治疗肝纤维化的新靶点。