第一部分荧光免疫层析法在儿童流感样病例病原诊断中的应用目的:评价荧光免疫层析法在儿童流感样病例病原快速诊断中的性能。方法:从2015年11月至2016年2月采集流感样患儿鼻咽拭子样本578例,比较荧光免疫层析法(Sofia甲乙型流感病毒快速检测试剂盒)与直接免疫荧光抗原检测(Direct immunofluorescence antigen detection)DFA法对同一份临床样本中甲乙型流感病毒检测结果的差异,两者检测结果不符时,采用RT-PCR进行验证。结果:荧光免疫层析法检测结果与DFA法一致性好,对于甲型流感,荧光免疫层析法的灵敏度、特异性分别为100%、96.53%;对于乙型流感,荧光免疫层析法的检测灵敏度、特异性分别为97.83%、97.04%,两者间的差异无统计学意义。荧光免疫层析法与直接免疫荧光抗原检测法两者检测结果不符的样本经RT-PCR法验证,其中18个甲型流感不符样本中16个检测为阳性,与荧光免疫层析法结果一致,荧光免疫层析法对甲型流感的特异性升至99.6%;17个乙型流感不符样本中15个检测为乙型流感阳性,与荧光免疫层析法结果一致,对乙型流感病毒的灵敏度和特异性分别升至98.4%和99.8%。结论:荧光免疫层析法操作简单、快速,与直接免疫荧光法相比,特异性和灵敏度高,机器判读,人工误差少。第二部分 湖南地区儿童流感病毒感染的流行病学调查目的:调查湖南地区儿童流感病毒感染的人群分布、临床特征,为流感的防治工作提供依据。方法:2016年3月～5月湖南省7家三甲医院疑似流感感染病例作为研究对象,(湖南省人民医院、益阳市妇幼保健院、岳阳市第一人民医院、湘西自治州医院、邵阳市中心医院、娄底中心医院、湘潭中心医院)收集临床资料,包括性别、年龄、流行病学暴露史、流感疫苗接种史、临床症状及实验室资料。采集所有患儿鼻咽拭子;研究启动前7家医院相关人员集体培训鼻咽拭子操作,资料填写;标本采集前征得患儿家属知情同意和医院伦理委员会批准。结果:1.研究期间共有2715例疑似流感患儿,其中流感病毒检出1386例(51%),甲型流感病毒检出305例(22.0%),乙型流感病毒检出1077例(77.7%),甲型流感合并乙型流感4例(0.3%)。男孩占61.5%(853/1386),女孩占 38.5%(533/1386),χ2=38.344,P=0.000,男孩较女孩多。2.小于6月龄(<6月)的52例(检出率20.7%),6月龄到1岁(6月～)患儿83例(检出率20.9%),1～岁患儿196例(检出率44.6%),2～岁患儿639例(检出率70.6%),6～12岁患儿416例(检出率57.3%)。经统计学分析(P<0.05),提示各年龄分布有差异。3.619例(44.7%)儿童在发病前明确与急性呼吸道感染症状或发热症状患者接触。144例儿童曾接种流感疫苗,其中32例流感病毒检测阳性。4.所有流感检测阳性患儿均有发热,有咳嗽症状的甲流患儿855例(85.8%),乙流853例(82.5%);流涕鼻塞甲流152例(51.2%),乙流613例(59.3%),咽痛甲流49例(16.5%),乙流249例(24.1%);喘息气促甲流7例(2.4%),乙流20例(1.9%);发热惊厥甲流11例(3.7%),乙流10例(0.09%);呕吐腹泻甲流21例(7.1%,乙流36例(3.5%)。相对于乙型流感,甲流患儿中的白细胞及中性粒细胞计数更高(P=0.010);进行CRP的患者有434例,其中甲流91例,<8mg/L 为 61 例,>8mg/L 为 30 例;乙流 343 例,<8mg/L 为246例,>8mg/L为97例,二者比较无统计学差异。结论:1.流感病毒是湖南地区儿童呼吸道感染的重要病原体之一。男孩较女孩易感染,2～12岁儿童最多,其中2～6岁年龄段为主;2.甲流较乙流症状更复杂,甲流患儿白细胞计数及中性粒细胞升高更明显。3.未接种流感疫苗较接种儿童更易感染流感。第三部分 流感病毒抗原消失时间探讨目的:动态观察经奥司他韦治疗后流感患儿流感病毒抗原,观察抗原阴转时间和临床症状消失时间,以及两者之间的关系,为患儿家庭预防及返校复工等提供指导及建议。方法:就诊于湖南省人民医院门急诊215例疑似流感患儿运用甲乙型流感病毒抗原检测试剂盒(荧光免疫层析法)行流感病毒抗原检测,阳性者予以奥司他韦抗病毒治疗5天,并嘱咐患者起病后5d,5～7d,7d～10d后,三个时间段复查流感病毒抗原,阴转后停止复查。结果:对215例流感病毒阳性患儿进行随访,起病5 d内流感病毒抗原转阴率为9.8%,5～7 d内累积转阴率为32.1%,7～10 d累积转阴率为98.1%;起病3 d内临床症状改善者有6例(2.8%),3～5 d临床症状改善者有176例(84.7%),5d后所有患儿临床症状均得到改善。结论:流感症状改善时间较流感病毒抗原消失时间短;流感患儿在症状消失,起病后7～10d左右绝大部分患儿抗原消失返校相对安全。