近几年,高血压是危害我国国民健康的主要疾病之一。据研究发现,至2013年,我国高血压患者已经突破2亿,而且每年还以1000万的速度增长。原发性高血压[1]是遗传与环境因素相互作用所致的慢性疾病。高盐、激素紊乱等环境因素在很多情况下是通过机体不同细胞的膜蛋白来发挥作用。肾脏上皮钠离子通道(epithelial sodium channel,ENaC)正是重要的细胞膜蛋白之一。越来越多的研究表明,临床上发现的难治性高血压,包括盐敏感性高血压[2,3],也与ENaC的表达及功能的过度激活有关。ENaC,主要存在于结肠,汗腺,涎腺导管和呼吸道的上皮细胞。在肾脏中,ENaC[4]主要分布于远端肾单位的远曲小管和集合管,通过介导钠离子的跨膜转运对钠的重吸收起限速作用。Derlin1[5,6]是内质网降解相关蛋白1,主要位于细胞质中,也是E3泛素连接酶的调节物。本课题主要探究Derlin1参与ENaC泛素蛋白酶体途径降解的分子机制。在本课题中,我们首先发现了 Derlin1能够在蛋白质水平降低ENaC的表达量,而在RNA水平对ENaC表达并没有改变,这就提示我们Derlin1对ENaC是在翻译后水平进行调控的,并且通过免疫共沉淀(COIP)我们发现Derlin1与ENaC具有直接的相互作用,而且二者结合在Derlin1的中部,进一步探究发现Derlin1能够促进ENaC的降解,并且加入MG132后,ENaC表达量上升了,这就提示我们ENaC能够进行泛素化降解,并且Derlin1对ENaC的泛素化降解具有调控作用。研究表明Derlin1能够促进ENaC泛素化降解,并且K11位点为Derlin1介导ENaC泛素化降解的关键位点。同时我们还做了质谱分析并且将Derlin1相关蛋白根据蛋白修饰进行分类,从中找到Derlin1介导ENaC降解的关键E3酶HUWE1。本课题深入了解ENaC降解的分子机制,为临床上寻找原发或继发性盐敏感性高血压的预防和治疗靶点具有重要的理论和指导意义。