移植供肝植入前后三种病理学形态的研究

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[目的]1.探讨供肝植入前后缺血再灌注损伤之小叶中央环状坏死的临床病理意义。2.探讨供肝植入前后肝组织中“球蛋白微”的形成原因、形态学特点、成分及意义。3.探讨供肝植入前后肝组织中“濒死肝细胞”的形成原因、形态学特点及其意义。[方法]1.第一部分:收集XXX医院病理科2008年1月-2011年12月无原发病变的移植供肝标本共95例,其中34例在修肝时和关腹前分别活检,另61例行关腹前活检。标本经HE染色,观察肝小叶中央静脉周围肝细胞环状坏死程度,并给予评分,对比修肝时与关腹前供肝的这种坏死程度的评分有无差异;观察术后5天内ALT、AST及TBil的变化,并研究这三个指标与肝小叶中央静脉周围环状坏死的相关性。2.第二部分:将第一部分收集的标本进行PAS染色、网纤-Masson染色、免疫组化IgG、IgM、IgA、C3d、C4d、Fib、Clq、CD61染色和电镜透射检查。对比观察修肝时与关腹前供肝的“球状蛋白微滴”含量有无差异,并研究关腹前环状坏死与“球蛋白微滴”含量的关系,以及术后5天内ALT、AST及TBil与“球蛋白微滴”含量的关系。3.第三部分:观察HE、PAS、网纤-Masson及不同免疫组化染色条件下“濒死肝细胞”的形态特点。对比修肝时与关腹前供肝的“濒死肝细胞”数量有无差异,研究关腹前环状坏死与“濒死肝细胞”数量的关系,并研究“濒死肝细胞”与“球蛋白微滴”的关系,以及术后5天内ALT、AST及TBil与濒死肝细胞数量的关系。同时随机选取20例关腹前标本进行TUNEL/IgG双染色,观察并研究细胞凋亡与濒死肝细胞的关系。[结果]1.(1)关腹前肝小叶中央静脉周围环状坏死评分显著高于修肝时(p<0.05)。(2)关腹前肝小叶中央静脉周围环状坏死评分与术后第1-5天ALT值、术后第1-4天AST值呈正相关(P<0.05),但与TBil数值变化无关(P>0.05)。2.(1)供肝修肝时和关腹前标本内均可见不等量的“球蛋白微滴”,HE和PAS染色皆呈均匀红色,圆形或类圆形,边缘清晰,大小不一,分布于肝细胞浆内、肝血窦或Disse间隙,以肝腺泡Ⅲ带较多;免疫组化染色显示,“球蛋白微滴”均呈IgG、IgM、IgA、 FibvC3d阳性表达,C4d、Clq和CD61均阴性。球状蛋白微滴直径范围为1.59-9.14μm,中位数为2.97μ m。(2)修肝时和关腹前“球蛋白微滴”评分无显著差异(P>0.05)。(3)关腹前环状坏死评分与“球蛋白微滴”评分无关(P>0.05)。(4)关腹前供肝组织中“球蛋白微滴”评分与术后肝功指标无关(P>0.05)。3.(1)供肝修肝时和关腹前标本内均可见不等量的“濒死肝细胞”,该细胞位于肝小叶内,尤其以中央静脉周围最多见。HE染色显示肝细胞呈轻度皱缩状态,细胞膜不规则,细胞核形态正常,胞浆颜色较深。PAS染色及网纤-Masson染色均可见细胞浆内有红染物质凝集。IgG、IgM、IgA、Fib染色细胞浆均阳性,其中IgG表达最稳定,C3d、C4d、 C1q、CD61染色阴性。(2)供肝修肝时和关腹前活检比较,两组之间“濒死肝细胞”免疫组化IgG、IgM、IgA、Fib评分均有显著差异(P<0.05)。(3)关腹前供肝“濒死肝细胞”IgG评分与“球蛋白微滴”评分无相关性(P<0.05)。(4)关腹前供肝“濒死肝细胞”IgG评分与环状坏死评分呈线性相关(P<0.05)。(5)供肝关腹前“濒死肝细胞”IgG评分低分组与高分组比较,两组之间肝细胞凋亡指数无显著差异(P<0.05)。(6)TUNEL/IgG双染色显色,凋亡的肝细胞与“濒死肝细胞”不完全重叠。(7)供肝关腹前“濒死肝细胞”IgG评分低分组与高分组比较,两组之间肝功能指标ALT、AST、 TBil均无显著差异(P<0.05)。[结论]1.再灌注损伤可加重供肝肝小叶中央静脉周围肝细胞环状坏死,关腹前活检标本的这种环状坏死评分对预测移植术后短期内肝功能变化情况有参考意义,这种环状坏死可做为IRI的一项重要评分标准。2.供肝植入前后肝组织中出现的不等量“球蛋白微滴”是冷保存过程中血浆蛋白凝集物。“球蛋白微滴”的含量与供肝小叶中央环状坏死程度无关,对移植后短期内肝功指标影响不大。3.供肝植入前后肝小叶内,尤其是中央静脉坏死肝细胞周围会出现一些细胞浆内渗入部分血浆蛋白的“濒死肝细胞”,这是肝细胞损伤的一种表现,是缺血再灌注损伤影响了肝细胞膜的通透性,在高灌注压力下,血浆蛋白渗入肝细胞内而形成的。“濒死肝细胞”对移植术后短期内肝功指标无明显影响。
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