金属基纳米材料的合成及其生物医学应用研究

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金属基纳米材料由于具有生物相容性好,抗菌性能好等诸多优点而备受关注。金属基纳米材料的生物医学应用很广泛,包括药物/基因载体,标记和跟踪剂,癌症治疗,成像和抗菌等。但是关于金属基纳米材料表面修饰、生物安全性以及在生物医学中的应用如癌症光热治疗、放疗增敏和生物毒性等诸多问题,仍然是研究的热点和难点。  本博士论文中,通过不同的方法,合成得到不同种类和结构的金属基纳米材料,并采用表面修饰的方法赋予其优异的水分散性和生物相容性,发展了金属基纳米材料在癌症光热治疗,放疗增敏及成像方面的应用,并对材料的生物安全性和抗菌行为进行了系统研究。本论文的研究内容分为以下五个部分:  (1)设计合成了以金纳米粒子为核、铂纳米粒子为枝杈的枝杈状纳米材料,并在其表面修饰了亲水性的聚乙二醇以增加其生物相容性。在纯油胺体系中,首先通过还原氯金酸制备金纳米颗粒。然后继续使用油胺体系,以所制得的金纳米颗粒为核,利用氢气辅助的还原方式,还原了乙酰丙酮铂,在金颗粒表面生长铂晶核,进而得到了枝杈状的金铂纳米材料。为了拓展其在生物医学方面的应用,利用硫辛酸封端的聚乙二醇聚合物与得到的金铂纳米材料反应,从而使其表面修饰了亲水性聚合物,得到能够在水相中稳定存在的枝杈状金铂纳米材料(Au@Pt Nanodendrites,简写为Au@Pt NDs)。并通过透射电镜(TEM)、能量色散X射线光谱仪(EDX)、紫外可见近红外分光光度计(UV-Vis-NIR)、动态激光光散射仪(DLS)、电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP-MS)对枝杈状金铂纳米材料进行了表征。  (2)聚乙二醇修饰的枝杈状金铂纳米材料(Au@Pt NDs)在光热和放射联合治疗方面的应用。通过细胞毒性测试及细胞内吞量测试对Au@Pt NDs进行生物学性能评价,并进一步研究了近红外光和 X射线照射与细胞凋亡的关系。在该体系中,金纳米核和铂纳米枝杈的结构有利于近红外光吸收和 X射线的区域剂量增强,从而增强光热及放射治疗的疗效。通过采用Au@Pt NDs,可以获得较好的协同治疗结果。此外,Au@Pt NDs还具有显著的计算机断层扫描(CT)成像信号增强功能,表明其具有通过成像指导肿瘤治疗的潜力。  (3)通过酯化反应合成了聚乙二醇修饰的二茂铁络合物(Fc-PEG),并研究了其作为放疗增敏剂的应用。利用核磁共振氢谱(1H NMR)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)和凝胶渗透色谱(GPC)对络合物的结构进行表征;通过荧光分光光度计、动态激光光散射仪(DLS)和透射电镜(TEM)对络合物的自组装行为进行研究;通过细胞毒性测试、流式细胞仪、活性氧测试等对自组装形成的纳米粒子进行生物学性能评价。并进一步研究了细胞内吞量、细胞内活性氧水平与肿瘤细胞凋亡的关系。该纳米络合物具有以下特性:  1.通过一步酯化反应制备,产率高;  2.使用聚乙二醇修饰能够提高二茂铁在水相中的稳定性;  3.能够自组装形成纳米胶束,且细胞内吞量高。结果表明,Fc-PEG具有放疗增敏的效果,具有潜在临床应用的可能。  (4)利用超声辅助水相剥离法合成二维片层二硫化钼纳米材料(MoS2)并研究了其生物毒性。通过透射电镜(TEM)、扫描电镜(SEM)及原子力显微镜(AFM)对其结构进行表征。通过菌落计数法(CFU),研究了MoS2纳米片对典型的革兰氏阳性细菌(大肠杆菌)和典型的革兰氏阴性菌株(金黄葡萄球菌)抗菌性能。通过分析活性氧的产生,并通过SEM检测形态变化,研究了抗菌的机制。进一步的通过CCK-8法测定评价其对真核细胞的细胞毒性。发现MoS2纳米片对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌有毒性,但对真核细胞毒性较小。  (5)利用超声辅助水相剥离法合成二维片层二硫化钨纳米材料(WS2)并研究了其生物毒性。通过TEM、扫描电镜(SEM)及原子力显微镜(AFM)对其结构进行表征。通过菌落计数法(CFU),研究了 WS2纳米片对典型的革兰氏阳性细菌(大肠杆菌)和典型的革兰氏阴性菌株(金黄葡萄球菌)抗菌性能。通过分析活性氧的产生,并通过 SEM检测形态变化,研究了抗菌的机制。进一步通过CCK-8法测定评价其对真核细胞的细胞毒性。发现 WS2纳米片对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌有毒性,但对真核细胞毒性较小。
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