可培养微生物在养殖池塘的物质循环、能量流动、生态平衡及环境净化等方面起着十分重要的作用,与蟹病的发生与防治密切相关。本文将传统分离培养方法与聚合酶链反应(PCR)、变性梯度凝胶电泳(DGGE)和核酸序列测定等现代分子生物学技术相结合,对三疣梭子蟹进水塘和养殖塘环境中的可培养微生物多样性进行了研究。本实验研究内容主要包括三部分:第一部分基于形态结构特征上的可培养微生物分群研究。10月份在三疣梭子蟹养殖池塘水体中分离240株细菌,根据菌落特征分成15个类群,其中有3个优势类群,5个较丰富类群和7个稀有类群。再依据菌体特征分为31个亚群,其中球杆状亚群是最优势亚群;结果表明进水塘和养殖塘的优势类群和亚群组成存在差别,当进水塘水体进入养殖塘后,其优势菌菌群和亚群都发生了显著改变;第二部分为可培养微生物遗传多样性的研究。建立实验分离到得可培养微生物的DGGE指纹数据库,同时测定了相应的16S rDNA序列并分析了它们的系统发育学地位。结果表明实验分离到得可培养微生物分为73个系统发育型,分布于细菌域中的3个门7个纲16个科中的大约20个属。涵盖菌株数最多的4个属为:Bacillus属、Vibrio属、Halobacillus属、Stenotrophomonas属。通过对比发现进水塘和养殖塘的优势菌种发生变化,并且进水塘的菌种多样性多于养殖塘。第三部分为养殖水体功能微生物菌群的研究。对上述菌株进行了转化氮、磷、硫元素化合物生态功能试验和酪蛋白酶,胶原蛋白酶,卵磷脂酶的生理生化实验。对它们在养殖环境内源污染中的作用进行了初步探讨。其中代谢硫化合物产H2S、还原硝酸盐和降解有机磷化合物的主要成员是Vibrio属的细菌。Bacillus属的细菌是还原亚硝酸盐和降解无机磷主要成员。实验中发现了具有多种生态功能的菌株,主要以Vibrio、Stenotrophomonas和Bacillus属为主。能够分泌多种胞外酶的菌株,主要以Vibrio、Stenotrophomonas和Bacillus属为主。它们为养殖池塘的有机物循环贡献力量。