多模态观察新型缓激肽B1受体拮抗剂R-954对乳腺癌皮下移植瘤的抑制作用

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研究目的:采用形态学、影像学和免疫学等方法多模态观察高选择性缓激肽B1受体拮抗剂R-954对乳腺癌皮下移植瘤的抑制作用,评价R-954对乳腺癌皮下移植瘤的抗肿瘤效果。研究方法:通过小鼠皮下接种乳腺癌4T1细胞,构建出小鼠乳腺癌皮下移植瘤模型。成瘤后随机分为两组,实验组(加药组)皮下注射R-954(注射剂量2mg/kg),对照组皮下注射等剂量PBS缓冲液。连续15天,每天皮下注射R-954,同时,每天观察、测量移植瘤体积,并绘制出两组的肿瘤相对体积生长曲线。R-954给药后第16天,应用MRI技术观察肿瘤形态和大小,通过影像工作站后处理软件(Extended MRWorkspace)测量出每只小鼠每个横断面的肿瘤截面积,通过层面间肿瘤截面积数值的比较,获取每只小鼠的肿瘤最大截面积,得出两组肿瘤各自最大截面积。在完成小鼠MR成像检查之后,处死小鼠,剥除移植瘤组织,通过电子天平称取肿瘤重量(瘤重),得到实验组和对照组的瘤重。瘤重称量后,两组分别取部分肿瘤组织进行RT-PCR(逆转录-聚合酶链反应)和免疫组化检测。RT-PCR和免疫组化分别检测移植瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)和CD34的表达水平。对以上各观察指标(两组间)均进行统计学分析、处理。研究结果:在连续15天皮下注射R-954后,实验组(加药组)的肿瘤体积为(468.43294.987)mm3,对照组(等量PBS缓冲液)的肿瘤体积为(843.349165.240)mm3。两组的肿瘤体积具有明显统计学差异(P <0.01);处死小鼠,称取瘤重,实验组和对照组的瘤重分别为(0.8090.149)g和(1.4660.225)g。两组的瘤重具有明显统计学差异(P <0.01)。根据公式计算每组小鼠的肿瘤相对体积,并绘制出移植瘤生长曲线。结果显示:对照组肿瘤呈递增生长,而实验组则生长曲线较为低平。MR成像结果显示连续15天给药后,实验组和对照组肿瘤最大截面积存在明显统计学差异(P <0.01)。免疫组化结果显示实验组CD34抗体标记的微血管密度值(MVD)降低,与对照组相比明显统计学差异(P <0.01)。RT-PCR结果显示实验组VEGFmRNA表达水平降低,与对照组相比具有统计学差异(P <0.01)。结论:新型高选择性缓激肽B1受体拮抗剂R-954可抑制小鼠乳腺癌皮下移植瘤的生长,这种抑制作用可通过形态学(肿瘤体积和瘤重)、MR成像、免疫组化和RT-PCR等多模态方法进行观察和评价。R-954可降低乳腺癌组织中VEGF和CD34的表达,对肿瘤的抑制作用可能是通过抑制肿瘤血管的形成而实现的。
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