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背景：重症急性胰腺炎（SAP）作为一种常见的急腹症，病因复杂，病情进展快，可迅速发展为全身炎症综合症（SIRS），进而发展为多器官功能障碍综合征（MODS），而内皮细胞作为血管的最内层屏障，其细胞间通透性增加可能参与了MODS的发生。细胞间紧密连接蛋白是细胞间连接的重要组成部分，在维持内皮屏障完整中发挥着重要的调节作用。近年来连续性血液净化（CBP）治疗已广泛应用临床抢救包括SAP、MODS在内的各种危重患者的治疗，明显的改善了患者的预后。我们既往的研究显示CBP治疗可以改善SAP患者内皮细胞通透性，但其机制是否与细胞间紧密连接异常表达与分布有关，有待进一步深入研究。本文旨在探讨细胞间紧密连接蛋白在CBP改善SAP患者内皮细胞屏障功能障碍中的作用。方法：用SAP患者CBP治疗的不同时间点血清刺激人脐静脉内皮细胞，或予不同浓度Rho激酶（ROCK）抑制剂Y-27632（5μ M、10μ M、20μ M）预处理后加入SAP治疗前血清干预内皮细胞。Fluorescence reader检测单层内皮细胞对荧光素标记的牛血清白蛋白的通透量，免疫荧光染色检测紧密连接蛋白Occludin、Claudin-1的分布与重排，Western blot检测Occludin、Claudin-1蛋白表达水平的变化，共聚焦显微镜观察F-actin应力微丝的形成。结果：正常单层内皮细胞Occludin、Claudin-1主要分布在细胞周边，细胞与细胞间连续连接形成光滑的连接带。SAP患者CBP治疗前血清刺激内皮细胞后，细胞通透性较对照组明显增加，而紧密连接蛋白Occludin、Claudin-1的连接中断或破坏，表达减少，F-actin应力微丝的密度及数量均增大，而经CBP治疗后血清刺激内皮细胞，内皮细胞通透性较CBP治疗前组降低，而Occludin、Claudin-1的连接中断或破坏有所恢复，蛋白表达水平增加，且具有显著性差异；应力微丝的数量和密度较CBP治疗前组减少。加入Rho激酶抑制剂Y-27632处理细胞后，与CBP治疗前组比，内皮细胞通透性降低，紧密连接蛋白Occludin、Claudin-1的连接中断或破坏较CBP治疗前组改善，同时蛋白表达水平增加，F-actin应力微丝的形成较CBP治疗前组减少，且其效应呈剂量依赖性。结论：SAP患者血清诱导的单层内皮细胞通透性明显增加，而CBP治疗后SAP患者血清诱导的内皮细胞的通透性降低，其机制可能是与CBP治疗后改善ROCK介导紧密连接蛋白Occludin、Claudin-1的表达和分布及细胞骨架蛋白F-actin的重构有关。