肿瘤是一种基因疾病，其发生机理及抗肿瘤药物的研发是当前生命科学研究的热点。本文应用现代生物学技术，观察乳腺癌、胃癌组织中PKCs表达及与肿瘤分化程度的相关性，研究PKCαsiRNA和阿霉酮A在体内外对胃癌细胞BGC-823的作用，对探索肿瘤发生、发展的分子机理和开发抗肿瘤药物及新技术具有重要的学术意义和潜在的应用价值。首先，研究了蛋白激酶C(Protein Kinase C，PKC)和乳腺癌分化及转移的相关性。通过免疫组织化学方法检测48例乳腺癌病人手术标本PKC同功酶蛋白表达，发现PKCα和PKCβ与乳腺癌分化程度无显著相关性；PKCη与乳腺癌分化程度显著相关；PKCζ与乳腺癌分化程度极显著相关；通过HE染色显示的乳腺肿瘤组织与PKC免疫组化的结果进行对照，发现PKCη、PKCζ的表达量在大多数乳腺浸润性导管癌细胞中明显增多，且在乳腺肿瘤组织胞浆中的表达与肿瘤的分化程度高低呈正比关系，与肿瘤的恶性程度呈反比关系。其次，采用免疫组织化学卵白素生物素过氧化物酶连接法对80例胃癌标本蛋白激酶C同工酶，包括PKCα等蛋白的表达水平进行对比研究，探讨它们在胃癌中的表达水平与肿瘤分化程度的相关性。结果表明，在Ⅰ-Ⅱ型与Ⅲ型胃癌中，PKCα阳性率分别为67.5％与19.1％(P＜0.05)，在胃癌未转移的病例中，PKCs蛋白表达水平普遍较高，PKCα与肿瘤转移关系有极显著意义(P＜0.01)。此外，PKCs蛋白表达水平与肿瘤患者的年龄无关。接着，研究了PKCαsiRNA在体内外对人胃癌细胞BGC-823的作用。构建了表达PKCαsiRNA的载体，将之转染入人胃癌细胞BGC-823中，发现PKCαsiRNA特异性地抑制目的基因的表达和人胃癌细胞的增殖，与细胞增殖相关基因c-myc、PCNA表达也出现下调，提示了PKCα水平变化可影响肿瘤细胞的正常生长，且抑制肿瘤细胞中肿瘤生长相关基因的表达。PKCαsiRNA经阳离子脂质体Oligofectamine包裹，采用瘤内注射处理，经PKCαsiRNA处理后的细胞在裸鼠皮下形成移植瘤的时间延长，具有较高的肿瘤抑制率，但随着时间的延长，其抑瘤率又逐渐下降，与对照组的差别逐渐缩小，可能是导入细胞内的siRNA逐渐降解而失去活性，提示反义基因治疗需连续给药或加用其它治疗才能达到最佳效果。最后，研究了本实验室从海洋微生物分离获得的化合物阿霉酮A在体内外对胃癌细胞BGC-823的作用。结果表明，阿霉酮A在体外能抑制胃癌细胞BGC-823的生长，当浓度为10μg／mL时其抑制率为80％，且胃癌细胞BGC-823的凋亡率随着阿霉酮A浓度的增加而逐渐升高。将胃癌细胞BGC-823注射到裸鼠皮下诱发肿瘤(移植瘤)，通过腹腔注射阿霉酮A13mg／kg(2次／周，连续四周)，阿霉酮A可抑制裸鼠体内移植瘤的生长。进一步的研究表明，阿霉酮A能够诱导内源TR3核浆转运，该结果证实了本实验室早期工作的结果，阿霉酮A能够在体内和体外诱导TR3表达和核浆转运，从而抑制胃癌细胞恶性生长。