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目的建立幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori,HP)感染的小鼠模型,研究高脂饮食诱导的肥胖对幽门螺杆菌感染后小鼠胃组织中胃粘膜炎症与STAT3表达的影响及其可能的机制.方法将40只SPF级C57BL/6J野生型小鼠随机分为未感染组和HP感染组,每组20只,感染组小鼠灌服HP菌液,未感染组灌服等量灭菌的PBS溶液,3周后将未感染组和HP感染组再各分为2组,每组10只,即正常对照组(NC组)、高脂饮食组(HFD组)、HP感染组(HP组)和HP感染+高脂饮食组(HP+HFD组),NC组与HP组持续给予普通饮食,HFD组与HP+HFD组开始给予高脂饮食。6个月后麻醉处死各组小鼠,收集其胃组织与血清。采用HE染色,观察组织病理学变化并对胃黏膜炎症情况进行评分;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中IL-6、IL-11、IL-17、IL-22、leptin的浓度;Real-time PCR检测各组小鼠胃粘膜组织中IL-6、IL-11、IL-17、IL-22、leptin和STAT3相关调控基因c-myc,Bcl-2,survivin,VEGF等的mRNA的表达量;Western Blot观察各组小鼠胃STAT3总蛋白及其磷酸化蛋白的表达。结果(1)各组小鼠体质量的变化:与NC组相比,HFD组小鼠体质量显著增加(P<0.01);与HP组相比,HP+HFD组小鼠体质量亦显著增加(P<0.01);而HP组与NC组之间,HP+HFD组与HFD组之间小鼠体质量无显著性差异(各为P>0.05,P>0.05)。(2)各组小鼠胃内菌量、胃黏膜炎症评分及HE染色情况:HP组与HP+HFD组小鼠胃黏膜中均检测到HP 16S rRNA的表达,两组细菌量无统计学差异(P>0.05);黏膜炎症积分评估的结果显示,HP+HFD组小鼠胃黏膜炎症程度明显高于HP组,具有统计学差异(P<0.01);HFD组较NC组胃粘膜炎症程度无明显差异(P>0.05);HE染色观察胃黏膜病理组织学改变和炎症细胞浸润情况:HP组与HP+HFD组小鼠粘膜炎症细胞浸润较多,尤其是HP+HFD组有较多的炎症细胞浸润,甚至形成了淋巴滤泡,而NC组与HFD组胃粘膜胃粘膜大致正常,仅发现少量炎症细胞浸润。(3)不同饮食6个月后,小鼠血清中的IL-6、IL-11、IL-17、IL-22、leptin的浓度和胃组织中mRNA表达水平在HP组小鼠中高于NC组,且差异具有显著性,(P<0.01);在HP+HFD组中明显高于HP组和HFD组,均具有显著性差异(P<0.01,P<0.01)。(4)四组小鼠STAT3总蛋白水平无明显差异(P>0.05);p-STAT3蛋白水平在HP组与NC组相比表达增加,且差异有统计学意义(P<0.05,),在HP+HFD组与HP组相比表达增加,且差异有统计学意义(P<0.05)在HP+HFD组与HFD组相比表达增加,且差异有统计学意义(P<0.05)(5)c-myc,Bcl-2,survivin,VEGF基因mRNA的表达水平在HP组明显高于NC组,且差异具有显著性(P<0.01),HP+HFD组明显高于HP组和HFD组,差异均具有显著性(P<0.01,P<0.01)。结论本次实验中:1、在胃粘膜组织中,高脂饮食诱导的肥胖可以促进HP感染后的胃粘膜炎症的发生。2、HP感染可能通过促进IL-6、IL-11、IL-17、IL-22和leptin等因子的释放,触发STAT3的磷酸化,上调其下游基因c-myc,Bcl-2,survivin,VEGF的表达,高脂饮食诱导的肥胖可以促进这一过程,两者具有协同效应,为研究肥胖对HP相关性胃疾病的影响提供一定的理论依据。