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葛根素（puerarin）为异黄酮类化合物，具有解热消暑的作用，目前已被证明对动物机体具有解热的作用。然而，葛根素在细胞或分子水平上的“解热”机制尚不清楚。本研究通过检测葛根素对热应激诱导的猪肾小管上皮（LLC-PK1）细胞AIF和cyt c基因表达以及它们蛋白的释放，caspase-9和casapse-3活性，以及Bcl-2/Bax、HSP72、HSP90和HSP60表达的影响，以探讨葛根素抗热应激的作用及其分子机制。 本研究为探讨热应激诱导LLC-PK1细胞线粒体凋亡相关因子的表达和活性情况，以及激活线粒体凋亡途径的时间。采用qRT-PCR方法和caspase活性检测试剂盒分别检测42℃热应激处理后0、2、4、8和16 h以及37℃培养的LLC-PK1细胞中线粒体凋亡途径关键因子HSP72、Bcl-2、Bax、AIF和cyt c的基因表达以及caspase-9和caspase-3的活性。结果显示，42℃热应激1 h即激活LLC-PK1细胞线粒体凋亡途径，且热应激后的0~8h线粒体凋亡途径处于活化状态，其中2h时最为活跃。 为探讨抗热应激葛根素的最佳用量，将LLC-PK1细胞分为不加葛根素的对照组（control）和分别加0.01、0.1、1、10和100μmol·L-1葛根素的葛根素组（pue），不加葛根素的热应激组（HS）和分别加0.01、0.1、1、10和100μmol·L-1葛根素的热应激+葛根素组（HS+pue），分别检测细胞存活率和细胞凋亡率。结果显示，10μmol·L-1葛根素能显著（P＜0.05）增加热应激LLC-PK1细胞的存活率，0.1、1和10μmol·L-1葛根素能够极显著（P＜0.01）抑制热应激诱导的细胞凋亡，而且没有细胞毒性，其中10μmol·L-1葛根素抗凋亡效果最佳。 然后使用10μmol·L-1葛根素探讨其抗热应激的分子机制。将LLC-PK1细胞分为不含葛根素的对照组（control）、热应激组（HS）和含10μmol·L-1葛根素的葛根素组（pue）、热应激+葛根素组（HS+pue），分别检测AIF和cyt c基因表达以及它们蛋白释放，caspase-9和casapse-3活性，以及Bcl-2/Bax、HSP72、HSP90和HSP60表达。结果显示，葛根素极显著（P＜0.01）降低了热应激细胞中AIF和cyt c基因表达以及它们蛋白释放，caspase-9和casapse-3活性和HSP60蛋白表达，以及显著（P＜0.05）降低了HSP90的表达，同时显著增加了Bcl-2/Bax（P＜0.01）和HSP72（P＜0.05）的表达。 综上，热应激使LLC-PK1细胞线粒体凋亡途径活化，诱导细胞凋亡，而葛根素可以通过抑制线粒体凋亡途径活化，上调HSP72表达，减轻热应激诱导的细胞凋亡损伤。