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目的:观察中药方剂石芍护睛汤对实验性兔干眼角结膜上皮细胞的影响。
方法:通过破坏兔睑板腺导管开口加上紫外线照射的方法来造成兔干眼病模型。随后随机将21 只兔分成空白对照组、中药组和西药组3 组,每组七只,分别给药治疗,并于第7 天、14 天、21 天、28 天进行角结膜荧光染色及虎红染色,裂隙灯下观察各组兔的角结膜染色情况。28 天后,处死兔子,取兔子的睑间结膜和角膜作组织病理学检查。用Bend 公司生产的试剂盒Human AnnexinVFTTkit(目录号:BMS306FL/C)来检测兔角膜上皮细胞的凋亡情况。
结果:各组在第14 天、21 天、28 天后角结膜荧光染色情况:中药组〈西药组〈空白对照组(大小表示染色面积的多少,面积越小,说明角结膜的情况越好)。角结膜组织病理检查显示:光镜下,淋巴、中心粒细胞大量增生,炎性纤维素渗出,角膜上皮不规则,部分有缺损。电镜下,空白对照组,角膜表层上皮细胞微绒毛和微皱襞肿胀、脱落,部分绒毛呈气球样变性,细胞水肿,间隙增大,线粒体肿大。结膜可见细胞层数明显增厚,可见大量淋巴中心粒细胞;西药组,亦见到角膜表层上皮细胞微绒毛脱落,变性,细胞水肿,细胞间隙变大,桥粒解体,线粒体呈泡泡状改变。结膜杯状细胞少见,有淋巴细胞侵入。中药组,角膜表层上皮细胞向外伸出较多的微绒毛和皱襞,细胞连接紧密,间隙较小。试剂盒检测显示,角结膜上皮细胞凋亡的数目百分比:中药组﹤西药组﹤空白对照组。
结论:干眼病患眼角结膜上皮细胞完整性受到破坏、炎症、细胞凋亡贯穿了整个发病过程始终,治疗效果说明中药石芍护睛汤对恢复角结膜上皮的完整性、消除炎症以及对凋亡细胞的逆转显示了良好的作用。