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目的:探讨低频电磁场(Low Fequency Electromagnetic Fields,LFEMF)对骨髓源神经祖细胞(Bone Mesenchymal Stem Cells-derived Neural Progenitor Cells,BM-NPCs)诱导分化和β-IIItubulin基因表达的作用方法:将骨髓源神经祖细胞置于神经细胞培养环境中诱导,并置于50 Hz、5 m T电磁场中诱导,60min/天,连续干预15天,同时设置对照组。用免疫荧光技术检测神经干细胞标志物Nestin、神经元标志物Tuj-1和神经胶质细胞标志物GFAP的表达,用Q-PCR检测神经干细胞标志物(Nestin、PSA-NCAM)、神经元标志物(β-IIItubulin)和神经递质(ACHE、5-HT、GABA)基因表达,用细胞电生理检测诱导后神经元样细胞电活动。结果:骨髓间充质干细胞在无血清的神经干细胞培养环境可形成表达Nestin阳性的骨髓源神经祖细胞;两组诱导后形成的神经元样细胞免疫细胞荧光结果示:Tuj-1和GFAP均呈阳性表达;Q-PCR结果示:对照组和磁场组Nestin、PSA-NCAM、Ach、GABA、5-HT基因表达水平与体外诱导前相比有统计学差异(P<0.01),电磁场组β-IIItubulin m RNA明显高于对照组(P<0.05)。细胞电生理检测:采集到细胞内自发性突触后电流,振幅为60m V,电流为200±30Pa(mean±SEM,n=6)的电活动结论:低频电磁场促进了骨髓源神经祖细胞向神经细胞分化,可能与β-IIItubulin基因表达上调有关。目的:探讨低频电磁场在骨髓源神经祖细胞移植治疗脑损伤大鼠运动功能恢复中的作用。方法:建立脑损伤大鼠模型,体外CD-Dil标记的BM-NPCs至脑损伤部位后,并置于50Hz、5m T磁场干预,60min/d,连续干预60天。实验分为对照组(C组)、BM-NPCs组(B组)、磁场组(E组)和磁场+细胞组(EB组)。分别在移植后的第1d、3d、7d、30d和60 d进行运动功能Wayne clark评分、grooming评分。同时,移植后第1d、7d和30d取材,进行HE染色观察各组脑组织病理情况,免疫荧光检测Dil标记的BM-NPCs在脑损伤区的存活情况及神经细胞标志物Neu N、GFAP、β-IIItubulin表达。结果:1、行为学评分:移植1d,各组Wayne clark、grooming评分结果比较无显著差异(P>0.05);移植3d、7d、30d、60d,各组Wayne clark、grooming评分结果显示各组之间相比较有显著意义(P<0.05),EB组变化明显。2、HE染色显示:造模7d,各组大鼠脑损伤灶周围组织碎裂,血管受压变形,血流量减少,神经细胞肿胀坏死,变性。移植7d,C组和E组脑损伤灶周围组织水肿,可见囊性空洞,神经细胞的数量明显减少,周围炎症细胞浸润,B组和EB组水肿较轻,囊性空洞范围局限,可见胶质细胞。移植30d,各组脑损伤灶周围组织有所恢复,与C组的囊性空洞相比,E组、B组和EB组均减少,EB组脑损伤灶周围细胞排类较整齐,组织水肿和炎症细胞消失。3、移植30d,C组脑损伤组织周围可见大量GFAP呈阳性表达的细胞,与C组相比,E组和EB组较少。移植7d,B组和EB组脑损伤组织周围未见Dil标记的Neu N和β-IIItubulin阳性细胞出现。移植30d,B组和EB组可见Dil标记的Neu N和β-IIItubulin阳性细胞与损伤区周围组织融合生长,EB组更明显。结论:低频电磁场能改善脑损伤大鼠患侧肢体运动功能,与低频电磁场干预有利于移植的骨髓源神经祖细胞在脑损伤区域分化为神经细胞有关。