【摘 要】
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该课题运用分子生物学手段构建反义RNA重组质粒表达载体,并转染真核细胞,建立hPARP-1缺陷细胞株;初步探讨hPARP-1蛋白正常及缺陷对不同剂量MMS和HQ毒作用影响及hPARP-1与适应
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该课题运用分子生物学手段构建反义RNA重组质粒表达载体,并转染真核细胞,建立hPARP-1缺陷细胞株;初步探讨hPARP-1蛋白正常及缺陷对不同剂量MMS和HQ毒作用影响及hPARP-1与适应性反应的关系.为研究hPARP-1基因功能及在高剂量下的遗传毒作用和低剂量ECPs接触时参与适应过程的细胞与分子机制提供理论依据.结论:1.成功地扩增出hPARP-1基因cDNA保守区目的片段并克隆入T载体,为构建反义RNA表达载体打下了基础.2.成功构建了hPARP-1基因反义RNA表达载体,为建立hPARP-1蛋白缺陷细胞株提供材料.3.成功构建了hPARP-1缺陷细胞株,为初步研究hPARP-1基因的功能提供有效细胞株.4.在正常生长环境下,除细胞周期发生了改变外,hPARP-1蛋白缺陷对细胞生长形态、超微结构、生长速度及在软琼脂中生长情况无影响,提示HLFP尚不具有在软琼脂中生长的特性,即不属于恶性细胞.5.hPARP-1蛋白缺陷细胞较正常细胞对甲基甲磺酸、氢醌毒作用敏感,提示hPARP-1蛋白缺陷细胞对毒物攻击的损伤效应增强.6.在低剂量环境化学污染物作用下,hPARP-1蛋白缺陷细胞和正常细胞一样有适应性反应,但低于正常细胞,说明hPARP-1蛋白在细胞适应性反应方面起重要作用.7.在中国壮族、布依族、苗族和水族人群中hPARP-1基因的外显子12、13、16、17和20及内含子2和12上可能存在多态性.
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