第一部分慢性社会挫败应激所致抑郁敏感小鼠前额皮层长链非编码RNA变化　　目的：抑郁症是个体遗传特质与生存环境共同作用所导致的慢性多因性精神类疾病。表观遗传学在抑郁症的发生发展中具有重要调控作用,对生物学、遗传与生存环境等多因素均产生关键性影响。非编码RNA调控是表观遗传学的作用机制之一，可能在抑郁症中具有重要调控作用。　　方法：建立C57BL/6J小鼠慢性社会挫败应激（chronic social defeat stress，CSDS）模型，使用Arraystar公司的Mouse LncRNA Microarray（8×60K）小鼠长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）芯片，筛选内侧前额皮层（medial prefrontal cortex，mPFC）脑区中表达具有显著性差异的lncRNAs及其基因座附近协同变化的基因，并对筛选出的表达具有差异性的LncRNAs进行生物信息学分析。　　结果：（1）建立C57BL/6J小鼠CSDS模型，通过社会接触和糖水偏好行为学实验将小鼠分为慢性社会挫败应激敏感型小鼠和应激抵抗型小鼠。（2）Mouse LncRNA Microarray数据显示：从约35,923条小鼠lncRNAs中检测出1,752条表达有差异性的lncRNAs，与对照组相比，应激敏感型小鼠mPFC中，表达上升的有614条，降低的有1,138条。（3）从约24,881条小鼠mRNAs中检测到1,045条表达具有差异性的mRNAs，其中升高的共有481条，降低的有564条。（4）基因本体论（gene ontology，GO）分析显示表达具有差异性的lncRNAs与神经系统的生物学功能、应激反应系统、感觉认知体系以及多巴胺、5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）等神经递质活性等多方面功能密切相关。提示我们lncRNAs在抑郁症中具有重要作用。（5）Pathway分析显示CSDS致应激敏感型小鼠mPFC脑区中表达有差异性的lncRNAs参与多种分子信号通路的调控，包括神经活性配体-受体相互作用信号通路、PI3K/Akt信号通路、突触多巴胺能信号通路等。（6）构建编码非编码蛋白基因（coding-non-coding gene，CNC）共表达网络。　　结论：通过对CSDS小鼠模型mPFC脑区进行高通量筛选，表明多种lncRNA和mRNA的表达谱产生改变。生物信息学分析提示这些表达有差异性的lncRNAs可能参与抑郁症的发生。　　第二部分 LincRNA-Gm2694对慢性社会挫败应激所致小鼠抑郁样行为的作用及机制　　目的：前期芯片研究发现，lincRNA-Gm2694在CSDS所致抑郁样模型小鼠的mPFC脑区显著升高，因此，我们进一步深入研究Gm2694对小鼠抑郁样行为的影响及其机制。　　方法：CSDS建立抑郁样小鼠模型；qRT-PCR技术验证Gm2694在CSDS模型小鼠mPFC脑区及其他脑区中的表达。利用生物信息学数据寻找Gm2694可能的蛋白作用靶点；通过miRNA数据库寻找Gm2694募集的miRNA。RNA-pulldown实验，获得与Gm2694形成lncRNA-protein复合物的相互作用蛋白，通过蛋白质谱鉴定，确认Gm2694的特异性结合蛋白。使用western blotting对Gm2694特异性结合蛋白的表达水平进行检测。构建siRNA沉默Gm2694表达的慢病毒载体，分别在BV2细胞和C57BL/6J小鼠mPFC内，进行Gm2694沉默实验。通过社会接触和糖水偏好行为学实验，研究Gm2694功能缺失对CSDS敏感型小鼠不良应激易感性和抑郁样行为的影响。脑片膜片钳实验研究Gm2694对CSDS敏感小鼠mPFC区的微小兴奋性突触后电流（miniature excitatory postsynaptic current，mEPSC）的影响。　　结果：（1）Gm2694表达水平在CSDS敏感鼠mPFC中显著上升（对照组：0.98±0.061；1.59±0.186，n=20，P<0.01 vs control），其表达水平在前额皮层（prefrontal cortex，PFC）上升46.6±7.1％（P<0.05 vs control），丘脑束旁核（Parafascular nucleus，PF）中上升119.2±32.1%（P<0.01 vs control），中央杏仁核（central amygdaloid nucleus，CeA）和海马（hippocampus，hip）中无显著变化。在纹状体（striatum，str）中降低至59.6±4.2%（P<0.05 vs control）。（2）由生物信息学数据可知，Gm2694位于Chromosome8:87，472，812-87，523，900，属于基因间lncRNA（long intergenic non-coding RNA，lincRNA），其基因座附近的蛋白编码基因为cbln1。（3）CSDS敏感小鼠mPFC中Gm2694招募4条miRNAs，其中 mmu-miR-155、 mmu-miR-128、 mmu-miR-410和 mmu-miR-449a均显著下降（mmu-miR-155：76.5±12.3%；mmu-miR-128：66.9±5.8%；mmu-miR-410：65.7±6.7%；mmu-miR-449a：45.5±5.2%；n=8, P<0.05 vs control）。（4）沉默CSDS敏感小鼠mPFC脑区Gm2694可完全逆转其抑郁样行为。（5）CSDS敏感小鼠mPFC脑区mEPSC的放电频率显著性降低，而幅度无明显变化趋势；沉默Gm2694可逆转mEPSC频率的降低。　　结论：Gm2694对CSDS应激所致小鼠抑郁样行为呈现多靶点网络式调控，对中枢神经系统突触可塑性以及抑郁相关miRNA的表达等均具有调控作用。