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揭示现代中药的物质基础、配伍规律和作用机制是中药现代化进程中有待解决的关键科学问题。本文以传统中药丹参为例,以体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为模型,考察丹参对内皮细胞的保护效应,特别是对内皮细胞功能有重要影响的黏附特性、屏障功能的调节,并对相关的信号分子进行了同步观察,从分子水平研究了丹参提取物及其活性成分对血管内皮细胞的保护效应。采用虎红染色法研究了丹参提取物(ESM)预孵内皮细胞对肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导的内皮细胞与白细胞黏附的抑制作用,利用ELISA、Western blotting和免疫组化技术观察了ESM预孵对TNF-α诱导的内皮细胞黏附分子表达及核转录因子(NF-κB)活化的影响。结果表明ESM显著抑制TNF-α诱导的内皮细胞黏附分子表达上调;抑制核因子抑制蛋白(IκB)降解,进而阻止NF-κB的活化,因此推测ESM抑制黏附分子表达上调与它抑制NF-κB活化有关。采用Transwell小室内培养细胞的方法,考察了ESM和其中的主要活性成分丹参素(DSS)、丹酚酸B(Sal B)和原儿茶醛对TNF-α诱导的内皮细胞单层通透性的影响。结果表明ESM和DSS、Sal B明显抑制TNF-α诱导的内皮通透性增加;研究还发现使用单体成分DSS、Sal B的效果不如ESM,说明ESM中各成分之间可能具有协同作用。这有利于临床上相对减少中药使用剂量,降低药物的毒副作用,而这正体现了中药的优势。考察了ESM及其活性成分对内皮单层通透性调节有关的跨膜连接蛋白(VE-cadherin)和胞内蛋白β-catenin及相关的信号分子,如血管内皮细胞生长因子(VEGF)、丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)的调控效应,以探讨其中的信号转导途径。结果表明ESM和活性成分DSS、Sal B显著降低TNF-α诱导的内皮细胞VEGF分泌;抑制ERK活化;降低VE-cadherin和β-catenin的磷酸化水平;阻止β-catenin与细胞骨架脱离,因此推测ESM及其活性成分对内皮屏障功能的保护作用是其抑制ERK活化,降低VEGF分泌,继而影响细胞间连接结构的结果。研究还发现ESM能有效地保护细胞膜,缓解H2O2对细胞的损伤。本文研究结果对阐明中药丹参对内皮细胞多靶点和多途径的作用特点具有重要意义,并为中药丹参的现代化研究和二次开发提供了依据。