【摘 要】
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小分子与蛋白质之间的作用已经被用于各个研究方向,可以被用来实现很多研究目的。本文借助这种特殊作用力主要是为了筛选淀粉样纤维的探针和构筑新型荧光纳米粒子。蛋白质的
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小分子与蛋白质之间的作用已经被用于各个研究方向,可以被用来实现很多研究目的。本文借助这种特殊作用力主要是为了筛选淀粉样纤维的探针和构筑新型荧光纳米粒子。蛋白质的错误折叠导致的淀粉样结块是诱发很多相关疾病的关键因素。对于具有对淀粉样蛋白形成过程的监测功能和抑制效力的新型小分子的开发和研究是目前迫切需要的。在这项研究中,利用小分子和变性蛋白质之间的作用,我们研究了一种传统的染料小分子-溴酚蓝(BPB),具有能够精确的特异性识别淀粉样蛋白的能力以及有效的阻碍淀粉样蛋白的形成。选取牛胰岛素作为淀粉样蛋白模型,在牛胰岛素纤维化的过程中,利用BPB作为监测小分子成功还原了牛胰岛素纤维化的三个阶段。当BPB作为抑制剂加入牛胰岛素体系中时,使得纤维化进程显著减速,并且大大降低了淀粉样的总量甚至是完全抑制。TBNCs纳米粒子是我们设计构筑的一种具有良好的生物相容性的新型水溶性纳米粒子,加热的牛血清白蛋白作为纳米粒子的骨架。由于硫黄素T(ThT)已经普遍被用来作为淀粉样纤维的染料,其可以与淀粉样纤维特异性结合。因此,在加热牛血清白蛋白的过程中,将ThT掺杂于牛血清白蛋白的骨架中。由于牛血清白蛋白变性生成类似于淀粉样纤维的结构,所以利用ThT与变性牛血清白蛋白之间的结合力,构筑了TBNCs的纳米粒子。工艺简单,成本低廉,绿色环保,良好的生物相容性,较强的荧光性质都使得该纳米粒子值得推广应用。此外,TBNCs可以标记DNA。尤其是作为核仁的染料,是这个纳米粒子的独特之处。文章中,该纳米粒子已成功被用来标记HeLa细胞的核仁。
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