黄酒糟蛋白酶法提取工艺研究

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本论文针对黄酒糟组织致密,粗纤维含量高的成分特点,从提高蛋白提取率的角度出发,重点针对黄酒糟蛋白的提取工艺进行了研究,探索了水洗和纤维素酶解条件,比较了碱法提取和酶法提取的黄酒糟蛋白的各种理化性质差异性。主要研究成果包括:(1)以60℃,1:6料液比水洗30min,可以获得蛋白质含量为35.71%的酒糟。根据几组预实验和纤维素酶的最适反应体系,确定纤维素酶的水解条件为:料液比1:10,加酶量28U/g,pH为5,反应时间30min,温度50℃,此条件下纤维素的降解率为37.25%。(2)通过单因素实验和正交实验,确定了碱性蛋白酶水解黄酒糟蛋白的优化工艺条件为:加酶量为2000U/g,料液比1:8,反应pH值10,反应时间3h,温度为50℃,蛋白提取率为74.42%。(3)通过正交实验确定了碱法提取黄酒糟蛋白的两种优化工艺条件:料液比1:8,pH值11,反应时间3h,温度为50℃,或是料液比1:8,pH值11,反应时间4h,温度为45℃。在这两个条件下进行提取,蛋白质得率约为67%。(4)对碱性蛋白酶提取酒糟蛋白进行二次正交旋转组合回归分析,检验结果保留了X1、X2、X3、X4、X12、X1X3、X2X3、X2X4、X32八个显著项,去除其它几个P值>0.1的不显著项,得到回归方程为:Y=74.19+1.07X1-0.64X2-1.05X3+1.95X4-1.24X12+0.92X1X3-2.34X2X3+1.51X2X4-0.51X32(5)通过SDS-PAGE对预消化蛋白的分子量分布进行了分析,发现碱性蛋白酶水解黄酒糟提取得到的产物主要是分子量小于4.1KDa的小肽物质,具有很好的溶解性;碱法制得的黄酒糟蛋白分子量主要分布在20—35kDa范围内,其溶解性很低。两种方法制得的黄酒糟蛋白,发泡性和乳化性不高,其发泡性分别为43%和27%。乳化性分别为50%和13%。
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