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目的1.在“两套管一支架吻合法”基础上,探讨大鼠左肺原位移植的最佳模型,为进一步开展移植肺的缺血再灌注损伤(IRI)提供动物模型基础。2.探讨再灌时不同pH值对大鼠移植肺缺血再灌注损伤的影响。方法1.外科显微镜下采用“两套管一支架法”完成大鼠同种异体左单肺移植模型,通过手术成功率、手术时间、病理学改变等指标评估模型的可行性。2.纯种雄性SD大鼠64只,体重250～350g,随机分为供受体进行鼠左单肺移植(n=32),移植后的大鼠根据再灌注前受体鼠所调整的pH值不同分为4组(n=8),即H组(pH=7.2±0.02),I组(pH=7.3±0.02),S组(pH=7.4±0.02),P组(pH=7.5±0.02),其中S组也归为正常值对照组;移植肺再灌注2 h后取肺组织,测定肺湿/干重比(W/D),肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性,丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),ELISA法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)的含量,RT-PCR法测定肺组织内细胞黏附分子-1(ICAM-1)mRNA的表达水平,光镜下观察肺组织的病理学变化。结果1.完成大鼠同种异体左单肺原位移植32例。供肺灌注到套管完成用时(20±4)min,手术平均时间(80±7)min。病理学检查证实移植肺再灌注2 h能复制出典型的IRI模型。2.再灌注2h后,移植肺取下进行检测:与S组比较,H组和P组肺组织中MPO活性、MDA、SOD、TNF-α、IL-8的含量及ICAM—1mRNA的表达无显著差异(P＞0.05);而I组肺组织中SOD的含量明显增高(P＜0.01),MPO活性、MDA、TNF-α及IL-8的含量均降低(P＜0.05),ICAM—1mRNA的表达也相比较低(P＜0.001);肺组织病理损伤轻;与S组相比,H组、P组及I组肺组织W/D无显著差异(P＞0.05)。结论1.本研究在“两套管一支架法”的基础上,综合分析国内外大鼠肺移植模型的优缺点,并对模型进行适当改良,力图建立大鼠左肺原位移植的最佳模型。本研究模型全部操作在外科显微镜下单人完成,缩短了手术的时间、降低了手术难度、提高了手术成功率。病理学检查显示该模型能复制出典型移植肺IRI的病理反应变化,是适合短期移植肺IRI研究的理想模型。2.适度降低再灌注时的pH值有效减轻了大鼠移植肺组织的水肿和渗出,减少了致炎细胞因子的表达,改善了移植肺的功能,起到了明显的减轻再灌注损伤的作用。