论文部分内容阅读
目的:观察七方胃痛颗粒对胃溃疡(gastriculcer,GU)模型大鼠的一般状态、胃黏膜病理形态学、免疫组化及原位杂交TUNEL细胞凋亡检测Bcl-2/Bax蛋白表达的影响,探讨七方胃痛颗粒治疗GU的作用原理。
方法:Wistar大鼠60只,雌雄各半,体重(200.15±5.24g),随机分为6组:空白组、模型组、七方胃痛颗粒大、中、小剂量组、对照组。除空白组外,其余5组以Takagi乙酸法手术造模。造模后第4天随机抽取2只进行病理形态学检测,提示GU动物模型复制成功。从第5天开始,除空白组外,其它五组分别给予生理盐水、奥美拉唑、七方胃痛颗粒大、中、小剂量灌胃。造模、灌胃期间观测大鼠一般状态,灌胃14天后,于各组随机取一半麻醉后处死,剖腹取胃,用于各项指标的测定,并进行病理形态学检测,提示溃疡愈合后,采用WatanabeIL-1β致胃溃疡复发,48h后,麻醉后处死,剖腹取胃,用于各项指标的测定。采用HE光镜观察胃黏膜病理形态学改变,免疫组化及原位杂交TUNEL细胞凋亡检测胃黏膜Bcl-2/Bax蛋白表达。
结果:(1)胃黏膜病理形态学影响:与模型组比较,七方胃痛颗粒大、中、小剂量组及对照组能有效改善GU模型大鼠受损胃黏膜组织的病理形态学改变。(2)胃黏膜组织Bcl-2、Bcl-2/Bax表达的影响:免疫组化及原位杂交TUNEL细胞凋亡检测,与空白组相比较,七方胃痛颗粒各剂量组、对照组Bcl-2、Bcl-2/Bax比值、Bcl-2mRNA表达阳性密度显著升高(P<0.05),而模型组显著降低。与模型组比较,七方胃痛颗粒各剂量、对照组Bcl-2表达、Bcl-2/Bax比值显著增强,差异有显著统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,七方胃痛颗粒中剂量组Bcl-2表达增强、Bcl-2/Bax比值明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)凋亡指数分析:与空白组比较,模型组、七方胃痛颗粒大、小剂量组及对照组胃黏膜凋亡指数显著升高(P<0.05)。与模型组比较,七方胃痛颗粒大、中、小剂量组及对照组胃黏膜凋亡指数显著降低(P<0.05)。与对照组比较,七方胃痛颗粒大、中、小剂量组胃黏膜凋亡指数有显著差异(P<0.05)。(4)溃疡指数及复发率:与模型组、对照组相比较,七方胃痛颗粒各剂量组的溃疡指数(GUI)及复发率明显降低(P<0.05);与对照组相比较,七方胃痛颗粒各剂量组的愈合率明显增加(P<0.05)。
结论:(1)七方胃痛颗粒有效改善了GU大鼠模型受损胃黏膜组织的病理形态学改变,维持胃黏膜腺体的完整性及减轻炎症浸润程度,能明显的提高愈合率,降低GUI及复发率。(2)七方胃痛颗粒能够增加Bcl-2蛋白和mRNA在GU模型大鼠胃黏膜上皮细胞中的表达强度,其治疗GU机理可能与胃黏膜上皮细胞凋亡的减少,抗凋亡基因Bcl-2蛋白和mRNA表达的增强,Bcl-2/Bax比值增高等有关。(3)七方胃痛颗粒各组之间治疗作用相比较,七方胃痛颗粒中剂量组,与七方胃痛颗粒大、小剂量组相比效果明显。说明中医治疗疾病用药剂量贵在精准恰当则效如桴鼓,过量与不及均不能达到预期疗效。