IRF9负调控SIRT1在高脂血症急性胰腺炎相关性肾损伤中的作用及机制研究

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目的高脂血症胰腺炎(hyperlipidemic acute pancreatitis,HLAP)患者的全身炎症反应更严重,比其他类型的胰腺炎更容易导致多器官功能损伤的发生。其中急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)最常见,约占20%。且AKI患者的死亡率增加了5倍。干扰素调节因子9(interferon-regulatory factor 9,IRF9)是沉默信息调节蛋白1(Sirtuin type 1,SIRT1)的一个负调节因子,在病情的转归中发挥着重要的作用。然而,关于IRF9及SIRT1在高脂血症胰腺炎相关性肾损伤中的作用并不明确。本研究拟探讨IRF9负调控SIRT1在高脂血症急性胰腺炎相关性肾脏损伤中的作用机制,以期能够对疾病诊断和治疗提供理论指导。方法清洁级健康成年雄性SD大鼠60只,体重300~350 g,随机分成普通组跟高脂组。分别用普通与高脂的饲料进行喂养。定时每组随机测血脂及胆固醇,当高脂组大鼠的血脂,胆固醇显著高于正常组时,再将普通组随机分成一般对照组和普通胰腺炎组,高脂组随机分成高脂对照组和高脂血症急性胰腺炎组。普通胰腺炎组和高脂血症急性胰腺炎组的大鼠通过腹腔注射20%L-精氨酸(1ml/100g)诱导急性胰腺炎模型,同时给普通对照组及高脂对照组的大鼠腹腔注射生理盐水(1 ml/100g)。24小时后,对各组大鼠用10%水合氯醛(1 ml/100g)进行麻醉,心脏采血,解剖取胰腺及肾脏组织。检测脂肪酶,淀粉酶,IL-1β,TNF-α的指标,将胰腺组织及肾组织标本进行光镜下观察并计算病理学评分。使用TUNEL法检测肾脏上皮细胞的凋亡变化;通过Western blot与q RT-PCR法检测IRF9、SIRT1的蛋白和m RNA的表达水平;Wsetern blot法检测p53及乙酰化p53的表达水平。结果1)与对照组相比,普通胰腺炎组和高脂血症急性胰腺炎组中的脂肪酶、淀粉酶、IL-1β、TNF-α等指标水平上升,胰腺及肾脏出现损伤,肾组织的凋亡增加,IRF9的表达水平上调,而SIRT1的表达水平下调。SIRT1的表达水平与IRF9的表达水平负相关(p<0.05);p53及乙酰化p53表达水平上升(p<0.05)。2)与普通胰腺炎组相比较,高脂血症急性胰腺炎组的胰腺及肾脏组织损伤更严重,同时肾脏组织凋亡更加显著,IRF9表达水平更高,而SIRT1表达水平下调更明显。结论高脂血症可能加重了胰腺及肾脏组织损伤。在HLAP相关性肾损伤的机制之一可能是IRF9作为SIRT1的一个负调控因子,下调SIRT1的表达,增加p53的乙酰化水平,加重肾小管上皮细胞的凋亡。
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