Toll样受体2,4在大鼠急性水肿性胰腺炎发病中的作用研究

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[目的]①探索正常大鼠胰腺组织TLR2、TLR4的分布表达情况。②探索大鼠急性水肿性胰腺炎时,TLR2、TLR4在胰腺组织、肠粘膜上皮的表达变化规律,为进一步研究以TLRs为主要识别受体的天然免疫系统在急性胰腺炎发病始动环节以及继发全身炎症反应综合征中的作用提供依据。 [方法]①实验动物分组:Wistar大鼠40只,按随机化原则将其分为4组(n=10)。A、B组为正常对照4h、12h组,C、D组为急性水肿性胰腺炎4h、12h组。采用皮下注射蛙皮素缩胆囊肽的方法诱发大鼠急性水肿性胰腺炎模型,对照组同样部位给予无菌生理盐水注射。②逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测大鼠正常及急性水肿性胰腺炎的胰腺组织中TLR2、TLR4R的mRNA的表达。③免疫组织化学从蛋白水平定位定性检测正常与急性水肿性胰腺炎胰腺组织与肠粘膜上皮TLR2、TLR4抗原的存在情况。④ELISA法检测炎性细胞因子TNFα、IL-1β、IL-6,同时测定血清淀粉酶水平。 汕头大学医学院博士学位论文[结果]①通过RT一PCR法在正常大鼠胰腺组织检测到TLRZ、TLR4目 的基因片段,急性水肿性胰腺炎组大鼠胰腺组织检测到表达 增强的TLRZ、TLR4目的基因片段。②免疫组织化学方法发现 孔R2、TLR4主要在正常大鼠胰腺组织胰管上皮、血管内皮上 表达,肠粘膜上皮亦有表达,急性水肿性胰腺炎时表达均增 强。③血清淀粉酶、TNFa、IL一lp、IL一6在急性水肿性胰腺 炎组明显上调,与正常对照组比较有统计学差异(P<0 .05), 与TLRZ、TLR4的表达强度呈平行关系。[结论]①正常大鼠胰腺组织有TLRZ、TLR4蛋白的表达,主要位于 胰管上皮、血管内皮,证明正常大鼠胰腺组织具有天然免疫 TLRZ、r比R4与胰腺生理、病理相关的受体基础。②大鼠急性 水肿性胰腺炎时,TLRZ、TLR4在胰腺组织、肠粘膜上皮的表 达增强,与血清淀粉酶、炎性炎性细胞因子TNFa、儿一lp、 IL一6的上调呈正相关趋势,提示TLRZ、TLR4可能有调控急性 胰腺炎时机体炎性反应程度的作用。
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