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大多数柑橘品种具有多胚现象。与珠心胚相比,合子胚在竞争上处于劣势,从而导致在杂交育种中合子胚退化或败育严重,这对于有性杂交育种是一个很大的障碍,导致近几十年来通过杂交育种方法选育并注册的柑橘品种所占的比例不到4.2%。因此,探索高效的合子胚分离技术,在合子胚尚未败育之前将其分离出来进行培养,克服珠心胚的干扰,挽救早期败育的合子胚,从而获得杂种苗,提高杂种率,是多胚柑橘杂种实生苗培育的有效途径,具有重要的实践意义。本实验通过杂交利用胚抢救技术得到如下结果：1.通过杂交创造新种质：对各杂交组合座果率统计发现：W.murcott ([C.sinensis×C.unshiu] Murcott)×早金(Citrus sinensis(L.)Osb.cv.Early Gold)座果率最高,种子也较多。并通过正反交发现四倍体伏令夏橙(Citrus sinensis(L.) Osbeck cv. Valencia)×二倍体德尔塔夏橙(Citrus sinensis(L.) Osbeck cv. Delta Valencia)杂交组合比二倍体德尔塔夏橙×四倍体伏令夏橙杂交组合的杂交后代中座果率要高。人工授粉各杂交组合座果率从高到低依次是：W.murcott×早金、二倍体德尔塔夏橙×四倍体伏令夏橙、早金(Citrus sinensis(L.)Osb. cv. Early Gold)×葡萄柚(Citrus Paradisi Macf.)、红肉脐橙(C. sinensis (O.) var. Cara Cara)×早金(Citrus sinensis(L.)Osb. cv. Early Gold)。移栽后统计发现,现有田间苗1218株,其中早金×葡萄柚杂交组合获得田间苗60株；W.murcott×早金杂交组合获得田间苗829株；红肉脐橙×早金杂交组合获得田间苗2株；二倍体德尔塔夏橙×四倍体伏令夏橙杂交组合获得田间苗136株；沙田柚(Citrus maxima (Burm.) Merr. cv. Shatian Yu)×早金(Citrus sinensis(L.)Osb. cv. EarlyGold)杂交组合获得田间苗116株；HB柚(C. grandis (L.) var. Hirado Buntan)×早金(Citrus sinensis(L.)Osb.cv. Early Gold)杂交组合获得田间苗75株。统计各杂交组合的移栽成活率发现早金×葡萄柚为61.22%,W.murcott×早金为79.86%,红肉脐橙×早金为100%,二倍体德尔塔夏橙×四倍体伏令夏橙为88.89%。用流式细胞仪对二倍体与四倍体的杂交组合进行倍性鉴定,发现在总共得到的136株田间苗中,有1株三倍体,2株四倍体以及133株二倍体植株。2.有性后代胚败育初观察：为了研究胚抢救的最佳时间,本实验通过W.murcott×四倍体Paper rind杂交组合,运用石蜡切片的方法制片,观察胚的解剖结构,确定授粉后70d为单独分离合子胚培养的最佳时期。并发现：以W.Murcott为母本、以四倍体Paper Rind为父本,授粉后45d未发现受精卵；授粉后50d受精卵继续进行细胞分裂；授粉后60d合子胚处于球形胚阶段；授粉后70d合子胚处于球形胚。此时为单独分离合子胚培养的最佳时期。授粉后75d胚囊内除合子胚外,已有大量珠心胚。授粉后80d胚囊内珠心胚猛增,一个胚囊中珠心胚可达10多个,已经分辨不出合子胚。