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目的:观察摄食行为改变(包括饥饿不同时段和再进食)对小鼠胃和下丘脑弓状核(ARC)中Obestatin表达的影响,探讨Obestatin在摄食行为调节中的作用;观察Obestatin在肥胖者外周血中的水平变化,进一步探讨Obestatin在肥胖的发生和能量平衡调节中的作用。方法:1.实验研究:将50只SPF级昆明雄性小鼠适应性喂养7天后随机分成5组:A组为饥饿0 h;B组为饥饿24 h;C组为饥饿48 h;D组为饥饿72 h;E组为饥饿72 h后再进食4 h,每组10只。分别于饥饿不同时段和再进食时观察各组小鼠体重的变化;并采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP法)观察小鼠胃和下丘脑弓状核中Obestatin表达的改变。2.临床研究:纳入受试者128例,分为正常对照组35例,肥胖组93例,肥胖组包括肥胖-糖代谢正常者46例和肥胖-糖代谢异常者(包括初诊断的2型糖尿病和糖耐量受损患者)47例。收集身高、体重、腰臀比(WHR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP);空腹10小时留取外周血分离血清和血浆,采用全自动生化分析仪检测空腹血糖(FPG)、糖负荷后2小时血糖(2hPG)、血甘油三酯(TG)、血总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平。采用酶联免疫吸附分析方法(ELISA)检测血浆Obestatin、Ghrelin和C反应蛋白(CRP)水平;放射免疫法(RIA)检测空腹胰岛素水平(FPI)。采用稳态模型评价胰岛素抵抗指数计算HOMA-IR指数(HOMA-IR)。采用SPSS 13.0软件分析Obestatin与上述指标的相关性。结果:1.实验研究结果:1.1饥饿和再进食对各组小鼠体重的影响各组小鼠在饥饿开始时体重差异无统计学意义。与饥饿0 h时体重相比,饥饿24、48、72 h后体重均明显降低(P<0.01),再进食4 h后体重增加(P<0.05)。1.2饥饿和再进食对各组小鼠胃组织Obestatin表达的影响与A组比较,B、C、D、E组胃Obestatin MOD值均明显降低(P<0.05),E组胃MOD值比B、C、D组升高,但差异无统计学意义。B、C、D组之间胃Obestatin MOD值差异无统计学意义。1.3饥饿和再进食对各组小鼠弓状核中Obestatin表达的影响经单因素方差分析,组间差异有统计学意义(P<0.01)。与A组比较,B、C、D、E组弓状核Obestatin MOD值均明显降低(P<0.05)。与D组比较,E组弓状核Obestatin MOD值略升高,差异无统计学意义(P>0.05), A、B、C、D组弓状核Obestatin MOD值呈逐渐降低趋势,但B、C、D组之间弓状核Obestatin MOD值差异无统计学意义。1.4胃和弓状核中Obestatin与体重变化的相关性分析线性相关分析结果表明弓状核MOD值与处死时体重、胃MOD呈正相关关系(r=0.324、0.346,P=0.022、0.014),与体重变化呈负相关(r= - 0.471,P=0.001)。2.临床研究结果:2.1研究对象的一般临床资料和生化特征正常对照组和肥胖组组间性别、年龄、TC差异无统计学意义(均P> 0.05)。与正常组比较,肥胖组BMI、WHR、SBP、DBP、FPG、2hPG、FPI、TG、HOMA-IR、LDL-C、CRP明显升高,HDL-C降低(均P< 0.05)。肥胖-糖代谢正常组和肥胖-糖代谢异常组组间性别、年龄、BMI、DBP、TC、HDL-C差异无统计学意义(均P> 0.05)。与肥胖-糖代谢正常组相比,肥胖-糖代谢异常组WHR、SBP、DBP、FPG、2hPG、FPI、TG、HOMA-IR、CRP均明显升高,LDL-C降低。2.2各组Ghrelin、Obestatin水平的变化与正常组比较,肥胖组Ghrelin、Obestatin明显降低(均P< 0.05) ,G/O比值无明显差异。与肥胖-糖代谢正常组相比,肥胖-糖代谢异常组Ghrelin、Obestatin亦明显降低(均P< 0.05), G/O比值升高(P< 0.01)。2.3 Obestatin和G/O比值与其他指标的相关性研究线性相关分析表明:Obestatin与BMI、WHR、SBP、DBP、HOMA-IR、FPI、FPG、2hPG、TG、CRP呈负相关;G/O比值与BMI、WHR、SBP、DBP、HOMA-IR、FPI、FPG、2hPG、TG、CRP无明显相关性。多元线性逐步回归分析显示FPG、BMI是影响Obestatin水平的独立相关因素(b= - 0.048、- 0.181,P=0.020、0.046 )。结论:1. Obestatin在胃组织和弓状核中高表达。2.饥饿和再进食状态胃组织和弓状核中Obestatin表达有变化,提示Obestatin参与摄食行为的调节,推测Obestatin表达减少可能参与维持能量平衡的稳态。3.肥胖者外周血Obestatin水平低于正常人,Obestatin参与肥胖的发生。4.随着Obestatin水平的下降,胰岛素抵抗程度逐渐增加,提示Obestatin水平的降低可能参与糖代谢紊乱的发生。5.血Obestatin水平与CRP负相关,提示Obestatin参与炎症反应的发生。