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本研究为兔VX2肿瘤血管化生长特征的解剖及病理形态学基础,探讨彩色、能量多普勒造影技术及动态灰阶造影技术在评价VX2肿瘤血管化中的应用价值。
方法:采用瘤块埋植法制备兔腿肌肉及肝脏VX2肿瘤模型。经耳缘静脉注入自制白蛋白包裹氟碳微泡造影剂,多普勒造影采用缓慢推注,灰阶造影采用团注方式。以彩色及能量多普勒显像方式观察造影前后肌肉VX2肿瘤的血供特征,并与DSA检查结果比较;以相干对比造影成像技术观察兔肝VX2肿瘤血管影像增强的动态变化,并与血管铸型方法建立的兔肝VX2肿瘤血管三维构筑模型对照分析;以彩色及能量多普勒造影技术,检测兔肝脏VX2肿瘤结节内部及瘤周血流特点及造影增强效果,选择造影前后多普勒显像时血流显示最多的切面,根据肿瘤内血流信号占肿瘤面积的比例分级如下:Ⅰ级为0%~24%,Ⅱ级为25%~49%,Ⅲ级为50%~74%,Ⅳ级为75~100%。同时利用免疫组化方法,行CD34单克隆抗体及VEGF多克隆抗体染色,测定肿瘤的MVD及VEGF表达,VEGF表达根据阳性细胞百分率进行分级,0%~24%为Ⅰ级,25%~49%为Ⅱ级,50%~74%为Ⅲ级,75~100%为Ⅳ级,并将超声检查结果与免疫组化结果进行相关分析。
结果:应用自制白蛋白包裹氟碳微泡造影剂配合多普勒显像技术可以显著提高兔腿部肌肉肿瘤血流显示率,造影后血流显示较造影前比较有明显差异(P<0.01),造影前无1例肿瘤可见良好的滋养血管,造影后有6例可见滋养血管由瘤体周边环绕并分支深入中心部分,血流信号清晰完整,与DSA检查结果表现了高度的一致性。
应用自制氟碳微泡造影剂,肝脏VX2肿瘤CCI造影显像可以观察到三个动态变化的时相过程即:①动脉相;②门静脉相;③肝实质相。在动脉相可观察到特异性的肿瘤血管增强,肿瘤切面适当时清晰可见滋养动脉显影,来源于第一肝门部,并向肿瘤延伸,肿瘤区可见紊乱的网络状强回声血管结构显影。血管铸型结果显示:肝动脉为供养肿瘤的营养血管,肿瘤内部为密集紊乱的动脉血管网,而肝实质的血供主要来自门静脉。
兔肝VX2肿瘤血管内皮细胞CD34免疫组化染色呈阳性,可见不同程度棕染的内皮细胞散在或密集成簇分布,微血管结构在肿瘤中的分布不均匀,有的聚集,有的分散,多数聚集在肿瘤边缘处,癌周与癌巢内MVD分别为50.1±11.7和22.3±14.9,两者比较有统计学差异(t=2.136,P<0.01)。正常肝组织内CD34不表达。VEGF弥漫性表达于癌巢中,靠近肿瘤边缘或坏死组织周围的区域表达较强,VEGF在正常肝脏细胞不表达或仅有微弱表达。VEGF高表达组MVD明显高于VEGF低表达组,并有显著性差异(P<0.01)。造影前后CDFI检测结果及造影前PDI检测结果与MVD及VEGF表达间均无明显相关(P>0.1)。造影后PDI检测的肿瘤内血流信号分级与肿瘤MVD具有相关性(r=0.789,P<0.05);与肿瘤内VEGF表达具有显著的相关性0=0.667,P<0.01)。
结论:彩色多普勒声学造影技术,可以敏感的显示肿瘤病灶内部及周边的血管分布状态、血流供应特征以及有关血流动力学方面的丰富信息,PDI造影显像增强优于CDFI造影显像。
利用解剖学血管铸型技术,可以直观的显示兔肝VX2肿瘤的血管构筑,为影像学检查评价肿瘤的血管化特征提供了可靠的解剖学基础。
利用CD34测定肿瘤微血管密度以及测定VEGF表达程度,不仅可以反映肿瘤新生血管的生长状况,而且也为影像学检查评价肿瘤的血管化特征提供了重要的病理学基础。
新型灰阶声学造影技术可以检测肿瘤特征性血管构筑,并能够通过对肿瘤血管形态及灌注时间变化的了解,判断肿瘤血管的类型,评价肿瘤的血管化特征,对肿瘤的诊断及鉴别诊断有重要的临床意义。
能量多普勒造影半定量指标血管阳性反应面积百分率分级可以间接反映肿瘤血管生成程度,为临床进一步了解肿瘤生物学特性、监测疗效及判断预后提供有价值的信息。