乳酸片球菌素抑菌谱及应用性研究

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本实验旨在探索产细菌素的乳酸片球菌的优化条件,细菌素的抑菌谱以及在乳品防腐中的应用,从而进一步完善乳酸片球菌素的基础性研究,为其扩大化工业生产和在食品保藏和防腐中的应用性研究提供理论依据。以从泡菜中分离出的一株乳酸片球菌为基础,通过正交试验进行发酵条件的研究,结果发现乳酸片球菌素的产量除了与菌株自身性质有关外,其他发酵条件对片球菌素的产量和活性也有很大的影响,如培养基组分,培养基pH,培养温度以及培养时间,试验确定了产片球菌素菌株的优化培养基成分[g/L]为:蛋白胨10、牛肉膏8、酵母粉6、葡萄糖15、吐温80 1、磷酸氢二钾3、乙酸钠5、柠檬酸三铵2、硫酸镁0.8、硫酸锰0.2、优化培养pH为6.0,优化的培养温度和培养时间分别为37℃和16h。以优化后的培养基为基础,比较几种常见的效价测定方法如二倍稀释法、牛津杯法和单菌落平板法,最终确定了以二倍稀释法与牛津杯法相结合为测定片球菌素效价方法更加准确;选择食品中常见的腐败和致病性微生物作为指示菌,采用牛津杯法,测定片球菌素的抑菌谱,结果表明,片球菌素对植物乳杆菌和单核细胞增多症李氏杆菌有明显的抑制作用,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157、绿脓杆菌、沙门氏杆菌没有明显的抑制作用。为了增强细菌素的抑菌活性,提高抑菌作用,本文尝试了通过片球菌素和乳酸链球菌素的复合,共同作用于指示菌。结果表明,以植物乳杆菌为指示菌,复合细菌素的抑菌活性比单一的细菌素提高了1.7倍,在此基础上,初步探索了两种细菌素的优化配比,分析了其协同作用的机理,为进一步研究细菌素的抑菌机理提供了理论支持。本实验还初步探讨了片球菌素在酸奶防腐和保藏中的应用,结果发现30天后添加片球菌素的样品中李氏杆菌的数目分别降低了2.90 logCFU/mL和2.56 logCFU/mL,而没有添加片球菌素的酸奶中李氏杆菌的数目仅仅降低了1.32 logCFU/mL。这一结果表明片球菌素能控制乳品中李氏杆菌的生长从而提高食品安全性。
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