前言 治疗性血管新生(therapeutic angiogenesis)是通过血管生成促进因子的直接应用,特异性转基因治疗及细胞治疗以促进缺血组织血管生成,改善心肌血供为目的的治疗。缺血性心脏病的治疗目的是扩张冠状动脉,促进血管新生,改善心肌血供。多种血管生成促进因子参与心脏新生血管形成,用于治疗性血管新生。其中,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)是最重要的并且研究较多的两种血管生成促进因子。本实验在体外培养大鼠心脏微血管内皮细胞(cardiac microvascular endothelial cell,CMEC),并应用Matrigel建立诱导血管腔样结构形成的体外培养体系,研究血管生成促进因子bFGF对诱导心脏微血管内皮细胞形成管腔样结构的影响,和bFGF对内皮细胞VEGF受体Flt-1的作用,进而探讨bFGF促进血管形成过程的作用机制。 方法 首先,参考Nishida等的实验方法,分离、培养大鼠心脏微血管内皮细胞。根据不同的实验因素浓度设计成浓度效应组:不同浓度bFGF(5,10,20,40ng/ml)和正常对照组(无血清DMEM培养液),分别作用24小时。应用Matrigel诱导管腔样结构形成的体外培养体系,检测不同浓度bFGF作用后,心脏微血管内皮细胞形成管腔的情况。RT-PCR检测各组血管内皮细胞的Flt-1mRNA表达量。最后统计分析结果。 结果 实验结果表明,应用Matrigel可诱导心脏微血管内皮细胞管腔样结构