卡他莫拉菌对大环内酯类和四环素类药物敏感性及相关耐药机制研究

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【目的】1、分析本院卡他莫拉菌临床分离株对大环内酯类药物的敏感性,并初步研究卡他莫拉菌大环内酯类药物相关耐药机制。2、分析本院卡他莫拉菌临床分离株对四环素类药物的敏感性,并初步研究卡他莫拉菌四环素类药物相关耐药机制。【方法】1、菌株来源和鉴定:标本来源为深圳市南山区人民医院2013年10月-2017年7月分离出的207株卡他莫拉菌。所有的菌株均通过BD细菌自动鉴定仪及质谱仪鉴定。2、琼脂平板稀释法检测MIC值:采用琼脂平板稀释法检测卡他莫拉菌红霉素、Telithromycin、Solithromycin、Cethromycin、多西环素、米诺环素、替加环素、Omadacycline和Eravacycline的MIC值。3、模板提取:将冷冻干燥保存的卡他莫拉菌复苏并接种至哥伦比亚血琼脂平板,在37℃下培养24h后,再分别将菌株接种至LB液体培养基进行过夜增菌。12-16h后用DNA提取试剂提取菌株的基因组DNA及质粒DNA。4、使用PCR反应检测大环内酯类药物及四环素类药物相关耐药基因:检测大环内酯类耐药基因(ermA、ermB、ermC、msrA、msrB、mefE/A)和四环素类耐药基因(tetB、tetL、tetM、tetW、tetQ、tetO、tetK)。【结果】1、卡他莫拉菌大环内酯类药物体外抗菌活性分析:根据EUCAST标准,卡他莫拉菌对红霉素的耐药率为23%,卡他莫拉菌对Telithromycin的耐药率为2%。卡他莫拉菌Solithromycin及Cethromycin的MIC90均为0.125μg/ml。2、卡他莫拉菌大环内酯类药物相关耐药基因检测结果:207株卡他莫拉菌中未检测到大环内酯类相关耐药基因。2、卡他莫拉菌四环素类药物体外抗菌活性分析:根据EUCAST标准,卡他莫拉菌对多西环素及米诺环素的敏感率分别为97%及98%。卡他莫拉菌新型四环素类药物替加环素、Omadacycline、EravacyclineMIC90均为0.125μg/ml。3、卡他莫拉菌四环素类药物相关耐药基因分布:共检测出tetB阳性菌株136株,tetL阳性菌株15株。【结论】1、根据EUCAST标准,本院分离出的卡他莫拉菌对红霉素的耐药率较高。卡他莫拉菌对新型大环内酯类药物表现出良好的敏感性。2、本研究未检测到大环内酯类相关耐药基因,关于卡他莫拉菌大环内酯类药物的耐药机制仍需进一步研究。3、本院分离出的卡他莫拉菌对四环素类药物表现出良好的敏感性。4、本研究检测到部分卡他莫拉菌四环素类耐药基因tetB、tetL阳性,但并不能确定tetB和tetL基因是导致卡他莫拉菌四环素类药物耐药的主要原因。因此,关于卡他莫拉菌四环素类药物的耐药机制仍需进一步研究。
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