益气活血化痰法对脑缺血再灌注大鼠葡萄糖转运蛋白、细胞间黏附分子-1表达的影响

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研究目标通过缺血性中风文献综述,系统掌握中西医关于缺血性中风理论和临床研究进展,在此基础上提出缺血性中风“气虚痰瘀”病机学说,使研究工作有据可依,并尽可能立足于学科前沿。通过实验观察,系统研究中医益气活血化痰法在不同层次、不同靶点、不同时段对缺血性中风的作用,从脑能量代谢、细胞黏附状态方面,观察益气活血化痰法对不同时间GLUT-1,ICAM-1表达改变为研究主要切入点,在分子生物学水平上阐明其作用机制及缺血性中风“气虚痰瘀”病机实质,并拟立拟气虚痰瘀证局灶性脑缺血再灌注模型客观化、定量化、规范化研究评定方法和多时点、多途径、多层次、多因素动态实验观察模式。力求为临床合理运用益气活血化痰法治疗缺血性中风,提高临床疗效,为开发中药新药提供科学的理论与实验依据。主要研究思路缺血性脑损伤是一个复杂的、动态的、连续的过程,因此研究应包含着多环节、多层次、多因素、多途径、多位点的综合作用。导师王键教授秉承家学,经过长期临床观察和实验研究认为在缺血性中风形成过程中,气虚为本,瘀血、痰浊的形成是其结果,作为病理产物的痰瘀又加重气虚的程度。因此认为气虚、痰瘀互结为缺血性中风病的主要病机特征之一。中药的治疗,主要是通过多层次、多途径、多靶点综合作用于多个病理环节,从整体上改善和保护脑缺血损伤。本课题基于脑缺血能量代谢及炎性反应的病理生理特征,以脑缺血再灌注后GLUT-1,ICAM-1表达为切入点,采用多因素制作的病证结合的动物模型,主要在分子生物学水平,研究具有益气活血化痰功效的中药复方制剂脑络欣通合二陈汤加减对脑缺血后GLUT-1,ICAM-1表达的动态影响。主要研究方法宏观研究方法是:对神经缺损体征、拟气虚痰瘀证候的观察。微观研究方法是:对病证模型鼠的血液流变学指标、血脂及Na+-K+ATP酶活性改变的观察,判断经过饥饿、疲劳、寒冷、促凝血状态、高脂饮食等因素作用,是否能使模型鼠气虚、痰瘀证候积分升高,初步具备中医气虚血瘀证候的一些特征,并具备和临床中风患者相似血液流变学改变,血液粘稠度升高,血脂异常改变,AI(动粥)指数升高,能量代谢低下等生化特征。动态研究方法是:采用饥饿、劳累、高脂饮食等多因素复合制作出气虚痰瘀证模型,然后用线栓法阻断大脑中动脉制作出局灶性脑缺血再灌注模型,脑缺血2h,分别再灌注3h、24h、72h。随机分为正常组、假手术组、缺血再灌注3h组、缺血再灌注24h组、缺血再灌注72h组、拟气虚痰瘀证缺血再灌注3h组、拟气虚痰瘀证缺血再灌注24h组、拟气虚痰瘀证缺血再灌注72h组、拟气虚痰瘀证缺血再灌注3h治疗组、拟气虚痰瘀缺血证再灌注24h治疗组、拟气虚痰瘀证缺血再灌注72h治疗组。宏观与微观相结合,治
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