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目的：S100A8和S100A9是小分子钙结合蛋白家族中的编码基因，其表达产物被认为与多种肿瘤的发生、发展有关，在某些肿瘤中发挥生物标记物的作用。本研究通过测定S100A8和S100A9基因在不同阶段急性髓细胞白血病（acute myeloid leukemia,AML）患者骨髓标本中mRNA水平的定量表达，回顾性地分析其表达水平与AML各项临床特征的相关性及预后意义。方法：病例来源于20072011年期间在苏州大学附属第一医院诊断和治疗的急性髓细胞白血病（AML）患者189例（初诊=91例、缓解=64例，复发=34例，排除急性早幼粒细胞白血病病例）；及20092012年期间在苏州大学附属儿童医院诊断和治疗的AML患儿50例（初诊=30例，完全缓解=20例，排除急性早幼粒细胞白血病病例）和急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿52例（初诊=32例，完全缓解=20例）；20例对照为同期的特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者或健康个体（成人=12例，儿童=8例）。采用患者的新鲜骨髓标本分离单个核细胞提取总RNA，逆转录成cDNA，再以实时定量RT-PCR方法测定S100A8和S100A9基因的表达水平，结合临床资料，分析其在成人和儿童AML中的表达特点、与治疗反应以及总体预后的相关性。结果：（1）.在成人AML中，疾病的不同发展阶段S100A8和S100A9的表达之间均存在显著正相关。S100A8和S100A9的表达水平在初诊和复发AML标本中无明显差异(Mediana8:0.379Vs0.526, Pa8=0.257; Mediana9:0.222Vs0.345, Pa9=0.239)，但二者均低于完全缓解（CR）组(Pa8 and a9<0.001)和对照组(Pa8=0.0078, Pa9=0.0015)。在91例初诊AML患者标本中，S100A8和S100A9在粒单核系分化的亚型（如：France-American-British [FAB]分型为M4及M5）中呈高水平表达(Pa8=0.043,Pa9=0.013)，而在FAB M0、M6及M7亚型的标本中表达量很低。S100A8的表达水平有预后意义，S100A8在转录水平高表达对于总生存期（OS）是不良预后因素（P=0.0012）。在多变量分析中，同时考虑年龄和初诊骨髓原始细胞百分比的情况下，S100A8高表达与AML预后密切相关（P=0.001）。在细胞遗传学为中等危险度的亚组中，S100A8高表达提示治疗反应不佳（P=0.0087）。尽管S100A9的表达并没有显示明显的预后意义，但S100A8/S100A9共同高表达仍然是不良预后因素（P=0.003）。（2）.在儿童AML中，S100A8和S100A9的表达水平初诊组显著低于完全缓解组(Mediana8:0.142Vs0.231，Pa8=0.005)(Mediana9:0.149Vs0.389，Pa9=0.004)和对照组(Mediana8:0.142Vs0.857，Pa8<0.001)(Mediana9:0.149Vs0.759，Pa9<0.001)。在ALL中，同样有S100A8和S100A9的表达水平初诊组显著低于完全缓解组(Mediana8:0.0184Vs0.958，Pa8<0.001)(Mediana9:0.0413Vs1.39，Pa9<0.001)和对照组(Mediana8:0.0184Vs0.857，Pa8<0.001)(Mediana9:0.0413Vs0.759，Pa9<0.001)。而初诊AML标本S100A8和S100A9的表达明显高于ALL标本(Pa8=0.0012、Pa9=0.05)。对于初诊AML患儿，S100A9高表达者早期治疗反应相对较差(Pa9=0.025)，S100A8有同样预后趋势，但无统计学意义(Pa8=0.06)。在初诊ALL中，S100A8和S100A9的表达水平无明显预后意义。结论：在成人和儿童急性髓细胞白血病中，S100A8和S100A9的表达水平与疾病的进程密切相关，并且可以作为骨髓中髓系细胞分化的标志；在成人初诊AML中，S100A8高表达是不良预后因素，它可能成为新的分子标志参与到AML的危险度分层中；对于儿童AML，S100A8和S100A9的表达水平具有评估早期治疗反应的作用。目的：本研究构建S100A8和S100A9基因的逆转录病毒载体，为研究这两个基因在白血病中的作用奠定基础。方法：RT-PCR扩增S100A8和S100A9基因全长cDNA，采用限制性内切酶酶切获得目的基因，基因测序分析技术证实基因序列的正确性，基因重组构建逆转录病毒载体质粒pMSCVneo-S100A8和pMSCVpuro-S100A9。结果：所获S100A8和S100A9基因经测序与GenBank比对序列一致，逆转录病毒载体质粒pMSCVneo-S100A8和pMSCVpuro-S100A9经EcoRⅠ和XhoⅠ以及HpaⅠ和XhoⅠ分别双酶切鉴定片段大小正确。结论：成功构建带有S100A8和S100A9基因的逆转录病毒载体，为研究S100A8和S100A9基因在白血病细胞中的作用奠定了基础。