片仔癀超分子客体特征及其靶向治疗肝炎的研究

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片仔癀是漳州片仔癀药业有限公司独家生产,为国家一级中药保护品种,是我国著名的中成药之一,有“中国特效抗生素”之美称。本品由麝香、牛黄、蛇胆、三七等组成,该药用于急慢性肝炎有较好的效果。因此,本文以片仔癀为模型药物,展开其归经、化学成分、血移成分及靶向治疗乙型肝炎的研究。片仔癀为中药复方,怎样根据超分子“印迹模板”及中医药理论制成适宜多成分群的靶向制剂,提高其治疗慢性肝炎的临床疗效及为进一步开发中药复方靶向制剂提供研究思路。目的:本课题以片仔癀为模型药物,预测片仔癀成分群能否归肝经;基于UPLC-MS研究片仔癀的化学成分(超分子客体);以SD大鼠为实验动物,研究片仔癀血移成分;以HBV转基因小鼠为实验动物,研究片仔癀以及其靶向制剂在治疗肝炎的有效性,为后续全面展开片仔癀有效化学成分及靶向治疗乙肝疾病提供实验依据。方法:(1)通过文献收集及数据库查找片仔癀的化学成分,与本课题组建立的归肝经化学成分进行对比,比较两者间化学成分的分子连接性指数,研究其超分子客体特征;(2)采用UPLC-MS技术对片仔癀醇提液及其标准品梯度洗脱,以正离子模式进行数据采集,分析片仔癀的超分子客体;(3)以SD大鼠为实验动物,灌胃给药,眼眶静脉采血,并通过高效液相色谱法记录血浆指纹图谱,分析片仔癀血移成分;(4)以HBV转基因小鼠为实验动物,以拉米夫定为阳性药组,片仔癀低、中、高剂量、片仔癀加柴胡、柴胡组,进行了肝炎指标检测,肝炎指标SPSS 19.0的Dunnett-t检验作统计学分析比较其治疗乙肝的有效性;片仔癀加柴胡、柴胡组、片仔癀低剂量组进行其靶向性分析,分析其靶向性。结果:(1)实验室建立的归肝经中药化学成分的分子连接性指数为9.47,片仔癀成分群的分子连接性指数为9.22,两者较为接近,片仔癀成分群可靶向肝脏;(2)根据已建立的数据库及文献报道,采用UPLC-MS技术共鉴定化合物35种,包括皂苷类26种、甾体类7种、其他类2种;(3)片仔癀血浆指纹图谱确定了片仔癀的最佳检测波长为203 nm;最佳给药剂量为6倍量;最佳采血时间为1 h;指纹图谱共标定27个成分,9个为血浆中内源性成分,5个为片仔癀原型成分,14个峰为其代谢产物峰或产生的新成分峰,确定3个入血成分为三七皂苷R1、人参皂苷Rgl、人参皂苷Rb1;(4)乙型肝炎指标统计学结果显示:7组间有统计学意义,而组内无统计学意义;在HBs Ag含量方面:拉米夫定组在治疗乙肝的有效性方面最优,片仔癀高剂量组与片仔癀联合柴胡组次之;在TB、ALT含量方面:拉米夫定组与片仔癀联合柴胡组在治疗乙肝的有效性方面最优,片仔癀高剂量组与柴胡组次之:片仔癀加柴胡、柴胡组、片仔癀低剂量组进行其靶向性分析结果显示,柴胡可以使片仔癀成分群靶向肝经,提高片仔癀在治疗肝炎方面疗效。结论:片仔癀成分群对肝脏有靶向性,通过本实验确定其化学成分及血移成分,在治疗乙肝疾病及靶向制剂的研究方面都有比较好的效果,为后续研究其治疗乙肝疾病的有效成分及中药复方靶向制剂的研究提供实验依据。
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