本文主要从以下几部分进行论述：　　第一部分 肠道病毒71型感染重症手足口病机械通气患儿预后的影响因素　　目的：分析肠道病毒71型（EV71）感染重症手足口病(HFMD)机械通气患儿的临床特点，寻找不良预后的危险因素以利于早期干预、改善预后。　　方法：回顾性分析2012年4月至2014年9月因重症HFMD入住我院PICU机械通气的81例患儿的临床资料及相关实验室检查。研究项目包括：（1）一般资料（年龄、性别）；（2）临床特点：四肢循环情况[将四肢循环不良（判断：四肢发凉，毛细血管充盈时间（CRT）＞2s及皮肤花纹等循环功能障碍表现）患儿根据循环不良程度分为：四肢循环不良肘膝关节以上和以下]、有无肺出血、有无消化道出血、有无抽搐、血压变化等；（3）辅助检查：胸部X片（肺内渗出性病变由2名高年资放射科医师判断，肺内渗出性病变根据渗出范围分为肺水肿累及＜1/2肺野和≥1/2肺野两组）、外周血白细胞计数、血乳酸、肝功、心肌酶、血糖等；（4）记录小儿危重病例评分（PCIS）值，将其分为≥90分和＜90分两组。分析它们对预后的影响。　　结果：（1）一般资料：痊愈组72例患儿中男47例（65％），女25例（35%）；不良预后组9例患儿中男6例（67%），女3例（33%）。不良预后组性别与痊愈组差异无统计学意义（χ2=0.007,P=0.934）；痊愈组年龄均数（24.08±16.43）月，不良预后组均数（12.67±9.73）月，不良预后组与痊愈组年龄差异有统计学意义（t=2.034,P＜0.05）。（2）临床特点：痊愈组72例患儿抽搐6例（8%）；四肢循环不良肘膝关节以上5例（7%）；血压升高55例（76%），降低2例（3%），正常15例（21%）；消化道出血13例（18%）；肺出血2例（3%）。不良预后组9例患儿抽搐3例（33%）；四肢循环不良肘膝关节以上7例（78%）；血压升高5例（56%），降低1例（11%），正常3例（33%）；消化道出血2例（22%）；肺出血5例（56%）。其中四肢循环不良、肺出血两组比较差异有统计学意义（χ2=26.441、21.936，P＜0.05）。（3）辅助检查：胸部X线检查提示81例患儿肺部均有渗出性病变（100%），痊愈组72例患儿胸部X线检查提示肺部渗出性病变累及≥1/2肺部1例（1%）；外周血白细胞数均数(11.81±5.06)×109/L；血糖均数(9.63±2.36)mmol/L；心肌酶CK-MB增高11例（15%）；肝功异常8例（11%）；血乳酸（3.06±1.67）mmol/L。不良预后组9例患儿胸部X线检查提示肺部渗出性病变累及≥1/2肺野6例（67%）；外周血白细胞数均数(19.04±8.37)×109/L；血糖均数(13.95±3.53)mmol/L；心肌酶CK-MB增高3例（33%）；肝功异常3例（33%）；血乳酸（5.84±3.17）mmol/L。其中肺内渗出性病变程度两组比较差异有显著统计学意义（χ2=36.306,P＜0.01）；不良预后组外周血白细胞数与痊愈组比较差异有显著统计学意义（t=3.727,P＜0.01），不良预后组血糖与痊愈组比较差异有统计学意义（t=3.571,P＜0.05），不良预后组血乳酸与痊愈组比较差异有统计学意义（t=2.589,P＜0.05）；（4）痊愈组72例患儿儿童危重病例评分≥90分60例（83%），＜90分12例（17%）。不良预后组9例患儿儿童危重病例评分≥90分1例（11%），＜90分8例（89%）。两组比较差异有显著统计学意义（χ2=18.726,P＜0.001）；（5）对单因素分析筛选出的8项可能影响患儿预后的因素，即年龄、四肢循环不良、肺内渗出性病变、肺出血、外周血白细胞、乳酸、血糖、危重病例评分，经逐步引入剔除法，建立logistic回归模型，显示四肢循环不良、肺内渗出性病变、肺出血、外周血白细胞、乳酸、血糖、儿童危重病例评分为EV71感染重症HFMD机械通气患儿预后的主要影响因素。　　结论：1．3岁以下是EV71感染重症HFMD机械通气患儿不良预后的高发年龄。　　2．当EV71感染重症HFMD患儿临床出现四肢循环不良至肘膝关节以上，肺内渗出性病变累及≥1/2肺野，肺出血时再予治疗，即使给予机械通气不良预后发生的风险也极大；　　3．外周血白细胞数、血乳酸、血糖显著升高，是EV71感染重症HFMD机械通气患儿不良预后的实验室预警指标。　　4．儿童危重病例评分与EV71感染HFMD病情危重程度和预后显著相关。　　第二部分 早期集束化治疗肠道病毒71型感染重症手足口病的效果　　目的：探讨肠道病毒71型（EV71）感染重症手足口病早期集束化治疗的效果。　　方法：针对研究第一部分影响预后的主要因素,参照卫生部手足口病临床专家组制定的《肠道病毒71型（EV71）感染重症病例临床救治专家共识》制定集束化治疗方案。比较两组PICU治疗时间、重症EV71感染HFMD患儿发展为危重症的比例、危重症患儿机械通气时间及不良结局（包括死亡、放弃后死亡、严重神经系统后遗症等）的发生比例等。　　结果：集束化治疗后，A组住PICU时间较对照组明显缩短（t＝3.70,P＜0.05）；A组重症患儿继续进展至危重症的比例较对照组明显降低（χ2＝4.32，P＜0.05）；A组危重症患儿机械通气时间明显缩短（t＝3.79,P＜0.05）。A组不良结局的发生比例较对照组明显降低（χ2＝4.33，P＜0.05）。　　结论：集束化治疗临床效果好，有助于提高手足口病救治的成功率。　　第三部分 血清S100B蛋白、NSE水平预测手足口病严重程度的价值　　目的：检测手足口病（HFMD）患儿治疗前后血清S100B蛋白、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平，探讨血清S100B蛋白、NSE水平预测HFMD严重程度的价值。　　方法：采用ABC-ELISA法对治疗前、治疗后7天患儿及对照组儿童血清S100B蛋白、NSE水平进行检测，进行病例对照研究。患儿血清S100B蛋白、NSE水平进行相关分析。以血清S100B蛋白、NSE水平作为预测指标来判断研究对象是否可诊断重症HFMD。　　结果：与治疗前比较，危重型组、重型组治疗后血清S100B蛋白[（0.35±0.27）ug/L，（0.31±0.10）ug/L]、NSE[（6.04±1.42）ug/L，（5.32±1.21）ug/L]水平明显下降，差异均有统计学意义（P＜0.05）；危重型组治疗后血清S100B蛋白、NSE水平与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；重型组治疗后血清S100B蛋白、NSE水平与对照组比较略高，但差异均无统计学意义（P＞0.05）。患儿血清S100B蛋白水平与NSE水平呈正的直线关系（r=0.969，P＜0.01）。　　结论：1.重症HFMD患者血清S100B蛋白、NSE水平均增高，且与病情严重程度相关，血清S100B蛋白与NSE水平呈正相关。　　2．治疗过程中监测血清S100B蛋白及NSE水平有助于了解重症HFMD病情变化及判断治疗效果。　　3.对血清S100B蛋白＞0.445μg/L或血清NSE＞5.9μg/L患儿应予高度重视，早期积极治疗，阻断病情进展减少不良预后。　　4.血清S100B蛋白及NSE并联检测对重症HFMD的预测价值优于单一指标。　　第四部分 肠道病毒71型感染手足口病S100B基因多态性研究　　目的：研究S100B基因rs9722位点基因多态性，探讨肠道病毒71型（EV71）感染手足口病（HFMD）的遗传易感因素。　　方法：采集外周血提取基因组DNA并应用吸收光谱法测定DNA浓度，运用聚合酶链反应(PCR)扩增后采用碱基直接测序检测S100B基因rs9722位点碱基变异情况，对数据进行统计学分析。进行基因多态性检测的EV71感染HFMD患儿74例进行了血清S100B蛋白水平检测，将检测结果在各基因型间进行比较。　　结果：与正常对照组比较，TT基因型频率在EV71感染HFMD患儿普通型组和重症组均明显增高，分布差异均有统计学意义（χ2=14.3、13.63，P均＜0.05）。重症组TT基因型频率及T等位基因频率均明显高于普通组，分布差异均有统计学意义（χ2=8.54、4.04，P均＜0.05）。在普通组患儿TT基因型频率和T等位基因频率均明显高于对照组（χ2=7.0、8.7，P均＜0.05）。进行基因多态性检测的EV71感染HFMD患儿74例进行了血清S100B蛋白水平检测，结果显示各基因型的血清S100B蛋白水平差别有统计学意义（F=24.91,P＜0.01）。EV71感染HFMD患儿S100B基因rs9722位点各基因型血清S100B蛋白水平均数间两两比较差别均有统计学意义（P＜0.01）。　　结论：S100B基因rs9722位点多态性与EV71感染HFMD相关，推测T等位基因是EV71感染后发生HFMD的高危宿主因素，可能增加EV71感染HFMD的发生率及严重性；TT基因型患儿S100B基因转录水平较高，体内血清S100B蛋白表达多，EV71感染后可能更易发生中枢神经系统损伤并发展为重症HFMD。提示S100B基因的遗传效应可能在手足口病发病中存在影响。