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猪繁殖与呼吸综合征（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome, PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome virus, PRRSV）引起的，以母猪繁殖障碍（流产、死产、弱胎、木乃伊胎）以及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为主要特征的一种新型传染病。该病1987年首次在美国发生，1990年首次在荷兰从肺泡巨噬细胞中分离到病原，之后在德国、西班牙、英国、法国、丹麦等国家也先后报道发生该病。1996年郭宝清等人用间接免疫荧光法首次证实本病在国内存在。PRSSV有2个血清型，美洲型和欧洲型，我国爆发的主要以美洲型为主。为了检测地方品种猪对PRRSV的耐受性及病毒在体内的增殖规律，15头经RT-PCR检测为PRRSV抗原阴性和ELISA检测为PRRSV抗体阴性的30日龄健康莱芜黑猪仔猪，随机分为2组，攻毒组10头，对照组5头，分别人工鼻腔接种1mL/头（104TCID50/mL）PRRSV液和PBS。分别于感染后观察攻毒猪的临床症状，并于第3d、7d、14d、21d、28d剖杀对照组1头、攻毒组2头试验猪，观察攻毒猪病理变化，采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、扁桃体、下颌淋巴结、腹股沟淋巴结和肠系膜淋巴结并立即放入液氮中，-80℃保存。为检测PRRSV在莱芜黑猪体内的增殖规律，本研究合成了TaqMan探针，并建立了检测PRRSV的绝对定量PCR方法，得到标准曲线方程为y=-3.1843x+39.241867，相关系数R2=0.99，该方法特异性和重复性好，灵敏度高，最低可检测到10拷贝数的病毒，比普通PCR方法高10倍～100倍。应用建立的荧光定量RT-PCR方法对各组织中病毒进行定量。结果表明，对照组莱芜黑猪PRRSV呈阴性，感染组PRRSV均呈阳性。PRRSV攻毒后第3d感染组猪的各组织中均检测到低拷贝病毒核酸存在，攻毒后7～21d，各种组织中的病毒载量维持在较高水平，而攻毒后第28d时，多数组织中的PRRSV病毒含量明显下降。扁桃体及各种淋巴结中的病毒载量要明显高于其他脏器，显示PRRSV在感染莱芜黑猪后对淋巴组织具有组织嗜性。建立检测PRRSV的四种受体（包括五号受体、唾液酸黏附素受体、CD163受体和波形蛋白受体）的相对荧光定量RT-PCR方法。应用建立的荧光定量RT-PCR方法检测攻毒后3d、7d、14d、21d、28d莱芜黑猪各组织中PRRSV的上述四种受体相对表达量变化情况。结果发现：攻毒后不同时间PRRSV四种受体在不同组织中的相对表达量出现不同变化。其中，攻毒后14dPRRSV的四种受体在脾脏中相对表达量都呈增加变化，而在扁桃体中四种受体表达量都呈减少变化。研究结果表明PRRSV感染莱芜黑猪后，体内各组织中PRRSV四种病毒受体相对表达量呈现不同的变化趋势，无明显规律。推测这种结果是实验动物数量所限造成的。