甲状腺结节与肥胖关联关系探讨及甲状腺乳头状癌lncRNA表达研究

来源 :南京医科大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:showfeeling
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目的:对2009-2010年南京某社区人群甲状腺疾病的调查数据二次分析,主要探讨甲状腺结节与肥胖的不同指标(体重指数和腰围)之间的关联关系。方法:通过对2009年12月~2010年6月期间在南京某社区进行甲状腺疾病的流行病学调查数据的再整理,最终有1482例符合条件的受试对象被纳入分析。利用问卷采集研究对象一般信息,并测量其身高、体重、腰围(WC)等肥胖相关指标,测定空腹血清促甲状腺激素(TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)及空腹尿碘(UI)水平,同时进行了甲状腺超声的检查。甲状腺结节被定义为超声发现的与周围正常甲状腺组织不同的独立实质性病变(不管其是否存在囊性)。根据国际糖尿病联盟诊断标准,中国成年人中心性肥胖定义为男性:WC≥90 cm,女性WC≥80 cm。而根据2016年中国专家共识,中国成年人超重/肥胖定义为体重指数(BMI)≥24 kg/m~2;同时,根据2017年美国糖尿病联盟(ADA)对亚洲成年人超重、肥胖的诊断标准将BMI重新分类:即超重(BMI≥23 kg/m~2)、肥胖(BMI≥25 kg/m~2),进行敏感性分析。结果:(1)纳入分析的1482例居民甲状腺结节的患病率为12.6%,其中甲状腺结节组超重/肥胖(BMI≥24 kg/m~2)比例高于非结节组,分别为51.9%,40.5%;中心性肥胖的比例同样是甲状腺结节组高于非结节组,分别为43.3%,24.2%。(2)在调整了其它相关混杂因素后,中心性肥胖仍然与甲状腺结节风险的升高成显著性相关(OR=1.62,95%CI:1.14~2.28),而基于BMI分类的超重/肥胖,无论是根据中国专家共识还是美国ADA对中国成年人超重/肥胖的诊断标准,其相关性不再具有统计学上的显著性意义。(3)在亚组分析中,无论是中国专家共识:超重/肥胖(BMI≥24 kg/m~2),还是ADA标准:肥胖(BMI≥25 kg/m~2)仅在女性中与甲状腺结节风险的增高呈显著性相关,前者OR=1.61(95%CI:1.01~2.54);后者OR=1.95(95%CI:1.14~3.34)。根据ADA标准,超重(BMI≥23 kg/m~2)、肥胖(BMI≥25 kg/m~2)在TSH>4.2 m IU/L亚组中与甲状腺结节风险升高均呈显著性相关,前者OR=5.59(95%CI:1.39~22.51);后者OR=5.15(95%CI:1.30~20.37)。(4)在亚组分析中,中心性肥胖在以下亚组中与甲状腺结节风险的增高均呈显著性相关:年龄<50岁组(OR=1.87,95%CI:1.05~3.32);年龄≥50岁组(OR=1.54,95%CI:1.00~2.37);男性组(OR=1.91,95%CI:1.14~3.20);TSH>4.2m IU/L组(OR=3.05,95%CI:1.01~9.22);尿碘≥200μg/L组(OR=1.79,95%CI:1.14~2.81)。结论:对于中国人群,腰围可能比BMI更适合用来评估甲状腺结节的发生风险。目的:甲状腺乳头状癌(PTC)是甲状腺癌中最常见的一种病理类型。本文旨在研究长链非编码RNA(lnc RNAs)在PTC发病过程中表达水平的变化及其对PTC细胞功能的影响,可能作用的信号通路,来探讨lnc RNAs在PTC发生发展中的作用及其机制,为PTC的治疗提供新的靶点或思路。方法:采用lnc RNA芯片检测4对PTC和癌旁正常甲状腺组织中差异表达的lnc RNAs;选择差异表达倍数前10位的lnc RNAs在86对经病理证实的PTC和癌旁正常甲状腺组织中进行荧光定量PCR(q RT-PCR)验证,进一步挑选出ENST00000539653.1(ENS-653)检测其组织表达与临床病理参数的关系;应用小干扰RNA(si RNA)技术构建低表达ENS-653的甲状腺乳头状癌IHH4细胞系,通过克隆增殖试验和CCK-8试剂盒检测IHH4细胞增殖能力的变化,观察低表达ENS-653对细胞周期和凋亡的影响,并应用western blot检测增殖、细胞周期及凋亡关键分子的蛋白表达情况;观察低表达ENS-653对有丝分裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路的作用。结果:(1)基因芯片结果显示,与癌旁正常甲状腺组织相比,PTC组织中共有1878个lnc RNAs呈现差异表达(倍数变化≥2.0且P<0.05),其中包括429个上调的lnc RNAs和1449个下调的lnc RNAs。(2)选择芯片中差异表达前10位的lnc RNAs在86对组织中进行q RT-PCR验证,结果发现,ENS-653的表达水平在PTC组织中显著高于非癌对照组,并且与肿瘤大小和TNM分期呈正相关。(3)体外试验证明,ENS-653水平下调可以抑制IHH4细胞增殖并诱导细胞周期G1-S期停滞,但对细胞凋亡没有影响,而增殖和细胞周期相关的关键蛋白PCNA、cyclin D1表达水平亦发生相应的下调,而凋亡相关的关键蛋白cleaved caspase-3表达水平无明显变化。(4)ENS-653下调可以抑制MAPK通路中蛋白p-ERK1/2和p-ERK5的表达,但对蛋白p-JNK和p-p38表达无影响,且应用MAPK抑制剂U0126处理后可以增强ENS-653对p-ERK1/2和p-ERK5的抑制作用。结论:PTC肿瘤组织中lnc RNA ENS-653表达水平增加;ENS-653可能通过激活MAPK通路中蛋白p-ERK1/2和p-ERK5的表达,来促进IHH4细胞增殖。因此,ENS-653可能是PTC的致癌性因子,可以作为PTC的诊断评估、预后判断的生物标志物。
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