论文部分内容阅读
目的探讨广西地区PTC中BRAF基因第15外显子T1799A的突变率与各临床病理学参数的关系,从而进一步提高PTC的临床诊断水平,为其预后评估提供客观依据,并为将来开展以BRAF基因为靶点的分子生物学治疗积累研究资料。方法收集广西医科大学第一附属医院2004年1月～2009年1月间经手术切除的60例PTC和20例甲状腺良性病变(结节性甲状腺肿10例、甲状腺腺瘤10例)石蜡包埋组织块,采用Omega公司的石蜡包埋组织DNA提取试剂盒提取石蜡组织切片的DNA, PCR扩增BRAF基因第15外显子,通过单链构象多态性分析(single strand conformation polymorphism,SSCP)找出异常条带,将有异常条带的PCR产物进行DNA序列双向测序。最后采用统计软件SPSS 13.0分析PTC与甲状腺良性病变组织中BRAF基因突变率的差异,并对PTC的各临床病理学因素中BRAF基因突变情况进行分析。统计方法用χ2检验,检验水准为0.05。结果1. BRAF基因突变在PTC组织中突变率为56.7%(34/60),而在甲状腺良性病变组织中突变率为0%(0/20)。PTC组织中BRAF突变率明显高于甲状腺良性病变组织,经χ2检验两组间有显著性差异(χ2 =19.710 ,P<0.001)。经DNA正反双向测序证实为错义突变,即第15外显子的单个碱基错义突变(T1799A)。2.BRAF基因T-1799-A突变率在患者性别组间差异无统计学意义(χ2=0.090,P>0.05);在年龄组间(≥45岁或<45岁)差异具有显著性意义(χ2=5.621,P<0.05);在肿瘤大小组间(≥2cm或<2cm)差异无统计学意义(χ2=2.241,P>0.05);在病理学亚型组间(经典型、滤泡亚型、高细胞型),差异有统计学意义(χ2=8.136,P<0.05);临近组织受侵犯组中BRAF基因突变率明显高于未受侵犯组,两组间差异具有显著性意义(χ2=7.483,P<0.05);在有无颈部淋巴结转移组间,差异有统计学意义(χ2=4.671,P<0.05);在临床分期组间(Ⅰ～Ⅱ、Ⅲ～Ⅳ期各为一组),两组间BRAF基因突变率差异有统计学意义(χ2=6.275,P<0.05);术后有复发组与无复发组间差异无统计学意义(χ2=4.477,P>0.05)。结论1、BRAF基因突变在广西地区PTC患者中检出率高,而未见于甲状腺良性病变,提示BRAF基因突变可作为鉴别PTC与甲状腺良性病变的分子生物学指标。2、BRAF基因突变与PTC临床病理学特征有着密切联系,可能作为一种新的标准来衡量PTC患者的危险度。