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软枣猕猴桃是新一代的水果之王,经过多年的人工栽培与发展已经成为人们生活日常中常见的食物。软枣猕猴桃相对于其他水果既含有丰富的营养物质,又具有有效生物活性物质。本文为提供软枣猕猴桃生物碱的提取最佳工艺、分离以及抗氧化活性的有效成分等方面的问题提供了科学依据,进行以下研究:本试验以利用响应面法对软枣猕猴桃生物碱的提取工艺进行了优化,使用Design-Expert8.0软件进行试验与分析。试验结果如下:软枣猕猴桃果肉中生物碱的模型所预测的最优提取条件为:甲醇浓度为75%,液料比为11.89:1,超声功率为250W,超声时间为10min,在此条件下,软枣猕猴桃果肉中生物碱的提取率为0.572mg/g。结合实际,将验证试验条件设置为:甲醇浓度为75%,液料比为12:1,超声功率为250W,超声时间为10min。软枣猕猴桃果肉生物碱的提取质量为0.571mg/g与预测的条件基本符合,证明了模型的可行性。软枣猕猴桃果皮中生物碱的模型所预测的最优提取条件为:甲醇浓度为74.57%,液料比为19.50:1,超声功率为210.98W,超声时间为17.76min,在此条件下,软枣猕猴桃果皮中生物碱的提取率为0.760mg/g。结合实际,将验证试验条件设置为:甲醇浓度为75%,液料比为20:1,超声功率为210W,超声时间为18min,软枣猕猴桃果皮生物碱的提取质量为0.758mg/g与预测的条件基本符合,证明了模型的可行性。本试验选用分级萃取方式对软枣猕猴桃中生物碱类物质进行分离纯化,得到含有生物碱的组分,对其进行大孔树脂分离。本试验选用D-101型大孔吸附树脂对软枣猕猴桃中生物碱类物质进行纯化。洗脱剂选择乙醇,其中75%、85%、95%乙醇都可以将生物碱类化合物洗脱下来,洗脱剂乙醇浓度达到75%时洗脱下来的生物碱类物质含量较多。对流出液进行波长扫描(190nm-600nm),含有生物碱的紫外峰值扫描大部分的峰值集中在197、213、241、247、343、355、376、459nm。生物碱类化合物伴随样品不断地被洗脱,对其洗脱液进行薄层层析显色,其显色反应均在洗脱液的后期,多数洗脱液的乙醇浓度大于75%才有显色反应,证明洗脱液中确实存在有生物碱类化合物。本试验选用高效液相色谱法对软枣猕猴桃中生物碱类物质进行分离纯化,效果良好。流动相:A为甲醇,B为氨水(pH=10)。流速为3mL/min,进样量为2μL,检测波长为250nm,本试验方法得到软枣猕猴桃种生物碱的成分为6种,分别其保留时间是5.450、6.446、6.956、11.370、11.698、21.147min。本试验对软枣猕猴桃果肉和果皮中所提取的总生物碱类物质进行了抗氧化活性的生物活性的测定与对比,其中抗氧化活性的测定指标包括超氧阴离子自由基、羟基自由基、DPPH自由基、还原力。试验结果如下:软枣猕猴果肉和果皮中的总生物碱类化合物对超氧自由基清除能力也随着浓度的增加而增大,呈正相关,当软枣猕猴桃生物碱类化合物的质量浓度大于200μg/mL时,对超氧阴离子自由基的清除率均达到饱和;在质量浓度50-200μg/mL范围内,软枣猕猴果肉和果皮中的总生物碱类化合物对羟基自由基的清除效果与提取物的质量浓度呈正相关关系,即清除率随着软枣猕猴桃生物碱类化合物质量浓度的增大而增大,浓度越高,抗氧化性效果越好;在质量浓度50-200μg/mL范围内,软枣猕猴桃生物碱类化合物对DPPH自由基的清除率随样品溶液浓度的增大而不断増大,与对照组趋势大致相同,清除能力相对V_C稍差;软枣猕猴果肉和果皮中的总生物碱类化合物的还原力在浓度50-150μg/mL范围内,随其质量浓度的增大而増强,V_C与样品之间还原力差异显著。整体上来讲,软枣猕猴果肉和果皮中的总生物碱类化合物具有一定的抗氧化活性。