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目的：以新泰密刺黄瓜种子根尖作为材料,得到清晰稳定的黄瓜根尖中期染色体C显带和G显带,为更好的区分黄瓜染色体提供准确的依据,进而把与芽黄突变相关的基因初步定位到染色体上方法：(1)采用改良的中期染色体C显带方法和ASG法G显带制作方法,制作黄瓜中期染色体C显带和G显带。(2)用荧光实时定量PCR对HemA1基因片段在芽黄和正常黄瓜叶片中的差异表达进行了定量分析。(3)采用荧光原位杂交(FISH)法对HemA1基因片段进行了染色体定位。结果：(1)常规压片法和去壁低渗法得到的染色体浓缩程度较大,显示染色体带纹较少,单倍染色体带纹总数都为12条,而利用改良后的方法得到的染色体浓缩程度较小,显示的染色体条纹数也多,其单倍染色体条纹总数为30条,每条染色体都显示了明显的着丝粒带、中间带和末端带。将用ASG法得到的清晰、稳定的黄瓜中期G显带染色体通过显微观察、照片测量,对染色体进行了配对,并对带纹特征进行了分析。除了第一对染色体相对臂比大于1.70,属于sm型,其余六对都属于m型。单倍染色体具有G显带条纹数22条。(2)HemA1基因在黄瓜正常叶片中的相对表达量为1.00×103,在芽黄突变体叶片中的相对表达量为0.38×103。HemA1基因在芽黄突变体的表达下调。(3)通过荧光原位杂交技术对HemA1基因进行染色体定位,杂交信号较弱,背景颜色较深,染色体定位不准确。结论：(1)染色体显带的多少和带纹特征与染色体的浓缩程度有关,浓缩程度越大,显示条纹数越少。使用不同的药品对材料进行预处理,会使染色体停留在不同的时期,也就会使制片中染色体的浓缩程度也不同。另外,染色体的C显带和G显带之间并无明显的界限,因为染色体制片、显带过程中的每一个环节对染色体显带都很关键,每一个环节的细微变化都会使染色体显示不同的带纹,所以只要处理条件适合,可以得到染色体C带和G带的中间带。(2)HemAl基因在正常黄瓜叶片和芽黄突变体叶片中的表达量有明显差异,且表达量下调,说明HemA1基因与黄瓜的芽黄突变有很大关系。(3)荧光原位杂交过程中的制片的酶解、固定、脱水、探针的长度及标记以及染色等多个因素会严重影响杂交结果。