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目的:观察复方中药肾痿方对慢性肾脏疾病大鼠的治疗作用;探索联合肾痿方和益生菌对慢性肾脏疾病大鼠肾脏、肠粘膜屏障结构和功能的作用及机制。为临床慢性肾脏疾病的防治提供理论基础。方法:将50只SD大鼠随机分为正常组(Nor),模型组(CKD),益生菌组(Prob),肾痿方组(SWF),益生菌+肾痿方组(Prob+SWF)。给予CKD组、Prob组、SWF组及Prob+SWF组共4组大鼠分别一次性尾静脉注射阿霉素(4mg/kg),并予腺嘌呤灌胃(200mg/kg/d)建立慢性肾脏疾病大鼠模型。Prob组、SWF组、Prob+SWF组分别在建模成功后给予大鼠双歧杆菌乳杆菌三联活菌片(20mg/kg/d),肾痿方中药(5.2g/kg/d),肾痿方(5.2g/kg/d)加益生菌(20mg/kg/d)治疗。予以Nor组和CKD组大鼠同等体积生理盐水灌胃。于治疗药物干预后第4周末收集24小时尿量后处死大鼠,测定24小时尿蛋白、血肌酐、尿素氮。采用鲎试剂偶氮基质显色法检测血浆内毒素。ELISA法检测血浆D-乳酸、血清IL-6、TNF-α水平。收集肾脏标本,行HE和Masson染色观察肾脏病理损伤及纤维化改变,免疫组化法检测肾脏TGF-β1的表达。收集小肠及结肠标本,HE染色观察病理改变,透射电镜观察细微结构和紧密连接。免疫荧光法检测肠上皮紧密连接蛋白Occludin的表达,免疫组化法检测肠粘膜CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞的表达。结果:(1)肾脏结构与功能:与Nor组比较,CKD组大鼠的24h尿蛋白,血肌酐,尿素氮均有显著性增高(P<0.01)。与CKD组比较,Prob组上述指标均降低,但无统计学意义。与CKD组比较,SWF组和Prob+SWF组的24h尿蛋白,血肌酐,尿素氮均降低(P<0.05)。三个治疗组之间,Prob+SWF组的上述指标与单独Prob组,单独SWF组比较,均有降低(P<0.05)。HE和Masson染色显示,CKD组大鼠肾小球硬化,肾小管扩张,上皮细胞坏死,炎症细胞浸润明显,大面积蓝染胶原纤维。与Nor组比较,CKD组肾脏组织病理评分及肾间质纤维化面积比均明显升高(P<0.01)。与CKD组比较,Prob组病理改变与纤维化面积无明显差异。与CKD组比较,SWF组和Prob+SWF组病理评分和纤维化面积均有降低(P<0.05)。三个治疗组之间,Prob+SWF组的上述肾脏结构指标与Prob组,SWF组比较,均有统计学差异(P<0.05)。TGF-β1免疫组化结果显示,与Nor组大鼠比较,CKD组大鼠TGF-β1阳性表达明显增多(P<0.01)。与CKD组比较,SWF组及Prob+SWF组大鼠肾脏组织TGF-β1阳性表达均有不同程度的降低(P<0.05)。三个治疗组之间,与Prob组及SWF组分别比较,Prob+SWF组TGF-β1表达均有减少(P<0.05)。(2)肠粘膜屏障结构与通透性:CKD组大鼠小肠绒毛倒伏,数量减少,上皮糜烂脱落,结肠绒毛刷状缘不连续。肠粘膜固有层出现大量炎性细胞及水肿。电镜下观察到紧密连接结构破坏断裂,微绒毛排列紊乱,部分脱落。与Nor组比较,CKD组大鼠肠粘膜病理评分及血浆D-乳酸水平均明显升高(P<0.01)。与CKD组比较,SWF组大鼠肠道病变稍有改善。与CKD组比较,Prob组和Prob+SWF组大鼠的肠粘膜病理评分及血浆D-乳酸水平均有明显降低,有统计学意义(P<0.05)。三个治疗组之间,上述指标Prob+SWF组较两个单独药物组均有统计学差异(P<0.05)。免疫荧光结果显示,CKD组大鼠肠绒毛近腔面上皮细胞之间的Occludin分布减少,不均,荧光强度变弱。与CKD组比较,Prob组、Prob+SWF组Occludin分布有增加,荧光强度增加,其中Prob+SWF组连接结构更完整。(3)系统炎症与肠道局部免疫:CKD组的血浆内毒素、血清IL-6、TNF-α均明显高于Nor组(P<0.01)。与CKD组比较,Prob组、SWF组及Prob+SWF组的三个指标均有明显降低(P<0.05)。三个治疗组之间,Prob+SWF组较Prob组和SWF组均有降低(P<0.05)。免疫组化结果显示,与Nor组相比,CKD组大鼠肠粘膜CD8+T淋巴细胞表达明显增加、CD4+T淋巴细胞表达明显减低(P<0.01)。与CKD组比较,Prob+SWF组的CD8+T淋巴细胞表达减少、CD4+T淋巴细胞表达增加(P<0.05)。三个治疗组之间,回肠粘膜中,Prob+SWF组的CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞百分比值较单独的Prob组和SWF组都有统计学差异(P<0.05),。结论:(1)肾痿复方能够改善慢性肾脏疾病大鼠的肾脏结构和功能。(2)肾痿复方联合益生菌对慢性肾脏疾病大鼠的治疗作用优于单独使用肾痿复方。(3)肾痿复方联合益生菌可明显改善慢性肾脏疾病大鼠的肠粘膜屏障结构和功能,且效果优于单独使用益生菌。(4)肾痿复方联合益生菌可明显改善慢性肾脏疾病大鼠的肾脏结构和功能,可能与调控粘膜免疫,修复受损肠粘膜以及减轻系统炎症有关。