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美洛昔康(meloxicam)是由酸性烯醇碳氧化物衍生而来的一种新型非甾体抗炎药。因其具有良好的抗炎、镇痛、解热效果和更高胃肠道耐受性,在兽医临床治疗方面应用广泛。近年来由于畜牧养殖行业转向规模化、集约化的模式发展,存在滥用兽药、不遵守休药期规定的现象,由此可能导致动物源性食品安全的问题。本研究建立了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测猪牛可食性组织(肌肉、肾脏、肝脏、牛奶)中美洛昔康残留量的方法,以期为动物源性食品中美洛昔康残留提供检测技术。由于组织样品与牛奶成分组成上存在很大不同,因此采用两种方法进行样品前处理。动物组织样品肌肉、肝脏与肾脏中的美洛昔康与内标(美洛昔康-d3)用乙腈-甲醇(95:5,V/V)溶液提取,定容后充分混匀,置于-20℃环境中冷冻60min后,准确移取6 m L用氮气挥干有机试剂,2 m L乙腈-水(1:1,V/V)溶液溶解残渣,再用乙腈饱和的正己烷除去其中的脂溶性杂质,高速离心后重复除脂一次,吸取下清液过0.22μm有机滤膜。牛奶样品中的美洛昔康与内标(美洛昔康-d3)用纯甲醇提取,经振荡、涡旋后,将提取液准确定容,混匀,精确移取5m L用氮气挥干,用1 m L 0.1%甲酸-乙腈(90:10,V/V)溶液溶解残渣,经涡旋、超声后高速离心除杂质,过0.22μm有机滤膜。将滤液用LC-MS/MS进行分析检测,0.1%甲酸水与乙腈作为流动相,梯度洗脱。在本实验方法中,测得猪肌肉、肝脏、肾脏组织中美洛昔康的检测限分别为2.5μg/kg、5.0μg/kg、5.0μg/kg;牛肌肉、肝脏、肾脏组织中美洛昔康的检测限分别为2.5μg/kg、5.0μg/kg、5.0μg/kg;牛奶中美洛昔康的检测限为1.0μg/kg。测得猪肌肉、肝脏、肾脏组织中美洛昔康的定量限分别为5.0μg/kg、10.0μg/kg、10.0μg/kg;牛肌肉、肝脏、肾脏组织中美洛昔康的定量限分别为5.0μg/kg、10.0μg/kg、10.0μg/kg;牛奶中美洛昔康的定量限为1.5μg/kg。美洛昔康在猪肌肉、肝脏、肾脏组织中浓度线性范围分别为5.0~60.0μg/kg,100.0~200.0μg/kg,100.0~200.0μg/kg,相关系数大于0.998,线性关系良好;美洛昔康在牛肌肉、肝脏、肾脏组织及牛奶中的浓度线性范围分别为5.0~60.0μg/kg,100.0~200.0μg/kg,100.0~200.0μg/kg,1.5~45.0μg/kg,相关系数大于0.997,线性关系良好。在猪与牛的肌肉、肾脏、肝脏及牛奶中分别添加LOQ、0.5MRL、MRL、2MRL四个浓度进行添加回收试验。测得美洛昔康在猪肌肉、肝脏、肾脏组织中批内平均回收率依次为92.00%~109.81%,101.96%~108.13%,94.04%~110.75%;批内变异系数依次为2.79%~7.59%,1.60%~4.09%,0.98%~4.93%;批间变异系数依次为4.96%~7.28%,2.71%~4.24%,3.78%~7.37%。测得美洛昔康在牛肌肉、肝脏、肾脏及牛奶组织中批内平均回收率依次为94.95%~111.36%,100.28%~120.33%,86.78%~116.07%,98.40%~115.20%;批内变异系数依次为1.67%~7.11%,1.16%~4.81%,0.39%~3.87%,0.78%~3.90%;批间变异系数依次为4.24%~6.28%,3.24%~6.85%,7.86%~12.34%,2.87%~5.41%。实验结果表明,本研究建立的LC-MS/MS检测猪牛可食性组织中美洛昔康残留量的方法操作简单、灵敏度高、重复性良好,符合兽药残留分析的要求。