【摘 要】
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目的:骨髓间充质干细胞已被试用于肝脏纤维化调节治疗,晚期血吸虫病所致肝纤维化的治疗目前尚无有效方法,因此间充质干细胞（mesenchymal stem cell,MSC）也被试用于血吸虫病肝纤维化治疗。前期研究初步发现IFN-γ和TLR4共激活的MSC可减轻血吸虫病肝纤维化,但机制有待阐明。巨噬细胞的极化调节是肝脏纤维化走向的中心环节。本研究进一步探讨IFN-γ和TLR4共激活的MSC对血吸虫病肝
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目的:骨髓间充质干细胞已被试用于肝脏纤维化调节治疗,晚期血吸虫病所致肝纤维化的治疗目前尚无有效方法,因此间充质干细胞（mesenchymal stem cell,MSC）也被试用于血吸虫病肝纤维化治疗。前期研究初步发现IFN-γ和TLR4共激活的MSC可减轻血吸虫病肝纤维化,但机制有待阐明。巨噬细胞的极化调节是肝脏纤维化走向的中心环节。本研究进一步探讨IFN-γ和TLR4共激活的MSC对血吸虫病肝纤维化以及对巨噬细胞极化的影响。方法:8周的BALB/c小鼠腹部剃毛,经皮肤感染15±2条尾蚴,感染后第1周和第3周经尾静脉注射生理盐水,或者MSC细胞,或者IFN-γ和TLR4共激活的MSC细胞,感染后第8周取材。比较肝脏切片HE染色,冰冻切片免疫荧光染色,通过实时荧光定量PCR检测纤维化指标、巨噬细胞极化指标,western blot检测巨噬细胞极化相关蛋白表达;体外实验检测了间充质干细胞对血吸虫感染小鼠骨髓来源巨噬细胞和Raw264.7细胞的极化影响。结果:研究发现IFN-γ和TLR4共激活的MSC能够减少血吸虫病肝纤维化的面积,降低α-SMA,col-Ⅰ等纤维化基因的表达,能够促使肝脏i NOS表达降低,Arg-1表达增加,F4/80+CD206+的M2型巨噬细胞增加,而F4/80+i NOS+的M1型巨噬细胞减少。体外实验发现,IFN-γ和TLR4共激活的MSC能够使血吸虫感染小鼠骨髓来源巨噬细胞i NOS、TNF-α基因下调,Arg-1上调;TNF-α蛋白水平下调,IL-10蛋白上调。IFN-γ和TLR4共激活的MSC能够上调Raw264.7细胞Arg-1、MRC-1、IL-10等基因,不抑制i NOS、IL-1β、TNF-α基因。结论:IFN-γ和TLR4共激活的MSC能够减轻血吸虫病所致的肝纤维化,而未诱导MSC无明显治疗作用;共激活MSC可能通过抑制M1,促进M2巨噬细胞极化,减轻急性期炎症反应或促进基质重塑。该研究为MSC用于血吸虫病肝纤维化治疗提供了新的依据。
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